操作原則
1、環境要清潔。
進行無菌技術操作前半小時，須停止清掃地面等工作，避免不必要的人群流動，減少人員走動，以降低室內空氣中的塵埃。防止塵埃飛揚。治療室每日用紫外線照射消毒一次，時間20~30分鐘即可，也可適當延長消毒時間。
2、工作人員進行無菌操作
衣帽穿戴要整潔。帽子要把全部頭髮遮蓋，口罩須遮住口鼻，並修剪指甲，洗手。
3、物品管理
無菌物品與非無菌物品應分別放置，無菌物品不可暴露在空氣中，必須存放於無菌包或無菌容器內，無菌物品一經使用後，必須再經無菌處理後方可使用，從無菌容器中取出的物品，雖未使用，也不可放回無菌容器內。
4、無菌物品
無菌物品必須存放於無菌包或無菌容器內，無菌包應註明無菌名稱，消毒滅菌日期，有效期一周為宜，並按日期先後順序排放，以便取用，放在固定的地方。無菌包在未被污染的情況下，可保存7-14天，過期應重新滅菌。無菌物品一經使用或過期，潮濕應重新進行滅菌處理。
5、取無菌物
操作者身距無菌區20cm，取無菌物品時須用無菌持物鉗（鑷），不可觸及無菌物品或跨越無菌區域，手臂應保持在腰部以上。無菌物品取出後，不可過久暴露，若未使用，也不可放回無菌包或無菌容器內。疑有污染，不得使用。未經消毒的物品不可觸及無菌物或跨越無菌區。
6、進行無菌操作時
如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，應更換或重新滅菌。
7、一物一人，一套無菌物品，只能供一個病員使用，以免發生交叉感染。
8、任何情況下，不得用嘴吸取菌液
基本操作
目的
取用、放置、保存無菌物品符合無菌操作原則，保證無菌物品和無菌區域不被污染。防止病原微生物侵入或傳播給他人。
評估
無菌技術操作比賽1.著裝整潔，
洗手，戴口罩，更換圓帽。
2.操作環境：
操作區域是否整潔、寬敞、安全；操作台是否清潔、乾燥、平坦。
3.無菌物品
無菌物品存放是否合理，是否在有效期內。
用品
治療盤內置：
無菌持物鉗浸泡於消毒液中、無菌治療巾、無菌儲槽、無菌液體、無菌紗布罐、無菌棉簽、無菌手套包、治療盤、2%碘酒、70%酒精、紙、筆、紗布、啟瓶器、彎盤。
要點：
①殺死規定作業系統（如試管、三角瓶和培養皿）中的一切微生物，使作業系統變成無菌；②在作業系統與外界的聯繫之間隔絕一切微生物穿過（如用火焰封閉三角瓶和試管等的開口,用棉花過濾空氣、用濾器過濾水等）;③在無菌室、超淨操作台或空氣流動較小的清潔環境中，進行接種或其他不可避免的敞開作業，防止不需要的微生物侵入作業系統
內容
1.檢查無菌治療巾的有效日期，解開系帶並纏好，按順序逐層打開。
2.用無菌持物鉗夾取無菌治療巾一塊放入治療盤內。
3.使用無菌持物鉗時保持鉗端向下，不可倒舉向上，用後立即放回。
4.取放無菌持物鉗時，鉗端應閉合，不可觸及容器液面以上部分。
5.未用完的無菌治療巾，應按原折折好系帶，註明開包日期與時間。（口述：有效期為24小時）
6.找到治療巾最外側邊緣，打開鋪成半鋪半蓋。
7.上層半幅反折三折到對面，開口處向外，露出無菌區。
8.打開無菌儲槽，用持物鉗夾取一個彎盤，再夾取一塊紗布放進彎盤內，放回持物鉗。
9.將上層無菌巾蓋好，邊緣對齊，並將開口處向上反折兩次，兩側邊緣向下反折一次，註明鋪盤日期與時間。（口述：有效期為4小時）
10.用紗布擦去無菌液體上的塵土，仔細檢查核對溶液後，撬去鋁蓋，兩手拇指將瓶蓋邊緣向上翻起鬆動。
11.用無菌持物鉗在無菌儲槽內夾取無菌治療碗，應托其底部，手不能觸及其內側及邊緣放下。食指和中指套住皮塞拉出，手不能觸及瓶口及蓋的內面。
12.手握瓶簽，先倒出少許溶液沖洗瓶口（倒入彎盤內），再由原處將溶液倒入治療碗內。
13.如有剩餘液體，常規消毒瓶塞後翻下。
14.註明開瓶日期與時間。（口述：有效期為24小時）
15.檢查無菌手套外面的號碼及有效日期，解開系帶並打開無菌手套包。
16.檢查手套放置的位置無誤後，取滑石粉塗擦在兩手掌和手背之間，剩餘的不再放回手套包內。
17.一手掀起口袋開口處，另一手捏住手套翻折部分（手套內面），取出手套對準五指戴好。
18.未戴手套的手掀起另一開口處，用已戴好手套的手，插入另一手套的翻邊內面（手套外面）對準五指戴好。
19.將手套的反折邊套在工作服袖上。（檢查手套有無破損、漏洞，擦去手套上的滑石粉）
20.操作完畢，（口述：用清水洗淨手套上的污物和血漬），脫去手套，第一隻脫去外側面，第二隻脫去內側面。
21.分類整理用物，洗手後放回保留物品。
22. 口述無菌操作的基本原則。
注意事項
1.使用無菌持物鉗時保持鉗端向下，不可倒舉向上，用後立即放回。取放無菌持物鉗時，鉗端應閉合，不可觸及容器液面以上部分。如用無菌持物鉗取遠物時，應連同鑷子筒移至無菌物品旁使用。
2.不能在無菌容器上方翻轉容器蓋，防止污染容器內物品。
3.無菌物品一經取出，即使未用，也不可再放回。
4.打開無菌包內，手不能觸及無菌巾的內側面，不可跨越無菌區。
5.倒溶液時，勿使瓶口接觸容器口邊緣。
6.戴手套時不可強拉，最後將兩手套反折面套在工作衣袖外面。
無菌物品的保管
1.無菌物品和非無菌物品應分別放置。
2.無菌物品必須存放那個在無菌容器或無菌包內，無菌包外要註明物品的名稱、滅菌日期，物品按日期先後順序放置。
3.定期檢查無菌物品保存情況，無菌包在為污染的情況下，保存期一般以7天為宜，過期或包布受潮應重新滅菌。
保管原則
無菌物品的管理應按醫院內部規定進行。所有無菌物品要標明滅菌日期與滅菌標記，和非無菌物品分開放置，無菌物品要放置在乾燥清潔的屋子內，放置無菌物品的容器要定期消毒；各類無菌物品應有規定的存放地點，每天檢查。通常一塊雙層包布的無菌包在沒污染的情況下可保持7d，用密閉的包裝紙或者塑膠袋可保持半年或者一年；存放無菌乾棉球、棉簽和鹽水棉球等沒有消毒液在內的容器，要每天滅菌。
