基本信息
出血性腸炎(HE)是4周齡或更大火雞的一種急性病毒病,以精神沉鬱、血便和死亡為特徵。感染集體的臨診發病一般能夠延續7—10天,但假如HE引起免疫克服後,繼發細菌感染,發病和死亡的病程可能還要延伸2—3周。由HE所造成喪失的完整記錄不曾保存下來,但估計美國在研製出疫苗之前每年要超越300萬美元。由免疫克服和繼發細菌感染所構成的喪失可能更高。當前,因為疫苗的廣泛使用,在美國高致病力的HE的暴發極其稀有。但當繼發細菌感染,特殊是繼發大腸桿菌病,疫苗的保護力可能降落。HE仍然被認為是影響商業化火雞主要經濟價值的一種疫病。
病原學
HEV屬於腺病毒科成員,DNA病毒。經過電子顯微鏡觀察超薄組織切片,發現HE病毒粒子無囊膜,呈20面體立體對稱,總殼粒數為252個,呈空的和緻密的兩種形態。它們在細胞核內不規則會集或呈晶格排列,在每個頂點上僅有一根五鄰體纖絲。HEV由11種不同的構造多肽組成,分子品質在14—97kD及9。5—96kD之間,其中的6種已被進一步鑑定。病毒粒子直徑為70—90納米不等,在蔗糖密度梯度研究中,HEV的浮力密度為1。34克/毫升。HEV抵抗力較強。70℃加熱1小時,37℃或25℃下乾燥1周,或用0。0086%次氯酸鈉,1。0%十二烷基磺酸鈉,0。4%氯殺蟎,0。4%Phenocide,0。4%Wescodyne,或1。0%來蘇兒處置,均可破壞HEV的感染性。
流行病學
天然和試驗宿主火雞、雉雞和雞是僅知的HEV及其關病毒的天然宿主。珍珠雞和鸚鵡也可能被天然感染。關於野禽,對42種禽類的血清學調查表明,除雞形目以外未發現感染的證據。甚至野生的雞形目成員(例如火雞),仿佛是因為其逃避本性,感染的危險很小。當火雞和雉雞感染時,仿佛宿主的遺傳性影響臨床發病和病變構成的嚴峻水平。試驗表明,火雞的HEV分離物能感染雉雞。用HEV試驗感染雞形目標其他禽種(包括金黃色雉雞、孔雀、雞、北美鶉和石雞),能夠產生病變。但在天然宿主以外的禽種上還沒有死亡的報導。
宿主的易感齡期在疫情報導中,HE發生於6—11周齡的火雞。最近的野外觀察表明更傾於感染7—9周齡的禽。僅有個別2周齡禽自覺感染HEV的病例被報導,人們認為是因為缺少母源抗體而引起的。一般認為4周齡以下的雛火雞很難感染HEV,是因為母源抗體的存在。有材料報導,在一定條件下,母源抗體能夠延續到6周齡。最近對孵化24天的SPF火雞胚成功地進行感染仿佛顛覆了這種說法。在缺少母源抗體時,雛火雞是易感的。但已報導13日齡和更小一些的雛火雞在缺少母源抗體的狀況下對HEV的感染具備抵抗力,表明所需要的某些品種的靶細胞還沒有成熟。
傳播途徑
HEV能夠經過感染性糞便經口腔或泄殖腔道路接種易感火雞進行傳播。病毒在潮濕的各種屍體中或感染性糞便的懸浮液中可維持感染性達數周。在污染的墊料中已發現HEV,而且在那些以前發過該病的房舍中能夠再次發病。還沒有經過蛋傳播的風行病學證據。在HEV的傳播中,除了機械媒介之外,還沒有牽涉到其他攜帶者和媒介。臨診症狀
臨診症狀在24小時內快速出現是HE的特徵。這些症狀包括沉鬱、血便和死亡。在瀕死和死亡禽直腸周圍的皮膚和羽毛上常含有血糞便。假如在這些雞的腹部稍加壓力可從直腸擠出相同的血便。發病率和死亡率
在野外發生的疫情,幾乎所有的禽都被感染,而且對試驗性攻擊具備抵抗力。在臨床上受感染精神沉鬱的小火雞,一般在24小時內死亡,或完全恢復。野外的死亡率領域從低於1%到略高於60%,平均大概為10%—15%。在試驗室的試驗中,當100%受到感染時,常出現80%的死亡率。病理革新
眼觀病變死亡的小火雞一般因失血而外觀蒼白,但其生長良好,且嗉囔中含有飼料。小腸一般擴張,極度變色,腸腔內充斥血性滲出物。腸黏膜充血,個別火雞黏膜外表籠罩有黃色、壞死性纖維素膜。病變一般在近側小腸更顯然,但在較嚴峻的病例也常擴散到遠端。感染禽的脾臟特徵性腫大、質脆,呈大理石或斑駁樣。然而,那些死亡雞隻的脾臟常常可能因失血隨後壓縮導致變得更小。肺也可能充血,但其他的器官呈蒼白色。據報導,死亡火雞肝髒腫大,不同組織均有點狀出血,但這些病變很不一致,因此不具備診斷價值。顯微病變特徵性HE的病理學革新大多見於淋巴網狀系統和胃腸道系統。死亡時的脾臟病變包括白髓增生、淋巴樣壞死和淋巴網狀細胞的核內包涵體。早在HEV感染後的第3天,脾髓面周圍可見顯然的白髓增生,這導致在感染後的4—5天,肉眼可見斑駁樣且不規則的白髓融合島。在感染後3—5天,經HE和免疫酶、過氧化酶染色,在這些區域可見大批的核內包涵體。從形態上看,這些細胞呈淋巴樣。同樣,脾臟的單核巨噬細胞中也發現有核內包涵體。到感染後的4—5天,白髓開端出現壞死。到感染後6—7天,已全體擴散,僅在紅髓處偶然見到一些漿細胞。在感染後3—9天,除了脾臟的革新外,在胸腺的皮質和髓質部及法氏囊,也可見淋巴樣衰竭。
胃腸道典型病變包括腸黏膜嚴峻充血,絨毛上皮細胞變性、脫落及腸絨毛頂端出血。因為固有層的血管是完整的,紅細胞經過血細胞滲出而移出血管外,因此,與其說是由內皮細胞破壞不如說是崩解導致出血。除乳頭細胞、漿細胞和異嗜細胞外,還在固有層發現了大批含核內包涵體的網狀淋巴細胞。這些組織病理學革新在十二指腸後段到胰導管處最顯然。但腺胃、肌胃、小腸、盲腸、盲腸扁桃體和法氏囊中與此相似,但病變水平稍低。
另外,在肝臟、骨髓、外周血液白細胞、肺臟、胰腺、腦和腎小管上皮細胞中也可觀察到含有HEV核內包涵體的細胞。
診斷
病毒的分離與鑑定從死亡或瀕死小火雞的出血性腸內容物或脾組織能夠發現大批的HEV。HE血清學陰性的火雞,最好是6周齡的小火雞,採用腸內容物經口接種,或用搗碎脾臟的生理鹽水粗提物經口服接種或靜脈注射接種。靜脈注射強毒分離物後3天和經口服接種後5—6天常發生死亡。那些未死亡的小火雞,脾臟含大批的病毒,一般表現腫脹,呈大理石樣。這時採集的血清內也含有病毒。此外還能夠採用成淋巴細胞樣的火雞源B細胞傳代系(MDTC—RP19)用作體外分離和培養HEV。一般採用瓊脂擴散試驗(AGP)方法來鑑定HEV及其相關病毒。將脾組織(新鮮的或冷凍的)用生理鹽水1:1稀釋,加入多克隆的抗HEV血清。採用免疫螢光和免疫過氧化物酶法能夠檢測冰凍或福馬林固定組織中的病毒抗原。近來隨著基因組序列資料庫,的建立,已經可容許採用尺度PCR以及巢式PCR檢測新鮮或冰凍組織及組織抽提物中的病毒DNA。因為PCR的使用,脾臟原材料或DNA提取物在濾紙上乾燥能夠用於保存。此外,不常用的檢測技巧;包括抗原捕捉ELISA、原位DNA雜交和制約性核酸內切酶指紋技巧。
血清學診斷感染HEV後2—3周康復禽的血漿或血清中,採用AGP法能夠檢測到HEV抗體。假如是依據血清學作出診斷,最好是檢測急性期和恢復期的血清。採用AGP法能夠險測到母源抗體,但這種方法一般對1周齡以後的禽敏感性較低。更敏感的ELISA方法已能夠檢測和定量HEV抗體。儘管多數禽類到3周齡時的血清反映仍呈陰性,但約4—6周齡時,這種方法就能夠檢測出火雞中的母源抗體。抗體最早在靜脈注射接種後3天就能檢測出來。
鑑別診斷在火雞中,假如出現大理石樣腫脹的脾臟,用AGP法不能證明有HEV抗原,而又缺少腸道出血現象,則應思索網狀內皮組織增生症或淋巴增生性疾病。在火雞,增大而充血的脾臟常被誤認為HEV所致,但多數是細菌性敗血症(如大腸桿菌病、沙門氏桿菌病、丹毒)所造成的結果。胃腸出血和黏膜充血可能與急性敗血症、病毒血症或毒血症有關。但這些很少能被觀察到,因為沒有其他與病因學相一致的病變或症狀。此外,也應思索到寄生蟲病如球蟲病和毒性物質(如重金屬和化學物質)。
防治
管理辦法
感染性墊料和糞便是最普遍的傳播媒介,所以首先要採用良好的生物安全辦法來預防和節制疾病。用0。0086%次氯酸鈉溶液或其他殺病毒製劑,包括酚類衍生物,輔以25℃乾燥1周能夠清潔和消毒污染了的設施。但在大多數商品雞群中,尤其是那些雞齡檔次多的雞場,要想對病毒進行全面殺滅是不切實際的。在這種狀況下,接種疫苗是節制和預防臨床發病的最可行辦法。疫苗
HEV的無毒力病毒分離物已經成功地被製成飲水型活疫苗。目前有兩種疫苗被廣泛使用:一種是接種了無毒力HEVⅠ(MSD毒株)或HEVⅡ(源於火雞)的4—6周齡火雞的脾臟製成的粗勻漿;另一種是在體外用MDTC—RP19傳代細胞系懸浮培養出產的。這兩種疫苗好像都能產生足夠的血清抗體和免疫保護,並在美國廣泛使用。但只有後一種疫苗能買到。外周血液白細胞中增殖無毒力病毒的第三種疫苗出產方法也已有報導,並已在加拿大投入使用。其他疫苗,包括一種純化的亞單位殼粒苗及基因工程苗、重組苗均在研製中。最初用禽痘病毒表達HEV殼粒蛋白的重組疫苗來減少火雞死亡率和嚴峻的腸道病變。經過試驗證明,重組疫苗能夠減少免疫克服。重組HEV纖絲蛋白基因轉基因植物正作為一種疫苗的模式被研製。近來已經報導了SPF火雞的OVO疫苗,3。5—6周齡間的健康火雞常用飲水疫苗。水中增長疫苗穩固劑(例如奶粉),清除任何消毒劑,包括水中的氯,這些對疫苗毒的存活和免疫的成功都十分必要。首次免疫試驗雞群的免疫保護率低於100%,它是經過以後2—3周后續的傳染而取得保護的。儘管如此,二次免疫也僅是偶然使用。
醫治:HE疫情暴發後剛出現症狀時,可採用恢復期雞群的抗血清0。5—1。0毫升/只進行皮下或肌肉注射醫治。
因為這些病毒能使機體產生免疫克服,因此,一定要思索對繼發細菌感染的醫治,主要是大腸桿菌病。依據細菌培養和藥敏試驗來選擇一種合適的抗生素。在商業化火雞出產中,使用合理的管理辦法,對暴露在野外的火雞接種能夠加劇本病的其他病原的疫苗(例如,Bordetellaavium,NDV),這些都不能被無視。