當某個電路含有電容器，在閉合電路時，電流不會立即達到穩定狀態。如果電路的電容量是為C（F），電阻為R（Ω），那么經過CR時間（單位為S），電容器上的電壓達到最終值的（1－1／e）倍，即0．63倍。等於CR的這段時間稱為該電路的時間常數。當藥物濃度為0.5\%時,可以使大鼠心肌細胞IKI內向成分降低，使－100mV時IKI電流密度從(-10.78±1.80)pA/pF降至(-7.18±2.05)pA/pF，平均抑制率為（33.1±16.85）\%(n=11,P<,0.05)，但不改變電流的翻轉電位及整流特性。藥物同時對Ito電流的瞬時成分有抑制作用，當60mV時,Ito電流密度從(-17.13±8.04)pA/pF降至(-7.74±4.76)pA/pF，平均抑制率為（50.60±10.77）\%(n=6,P<,0.05)，穩態失活曲線左移，失活後恢復時間常數增大。當藥物濃度為0.5\%時，對IK有電壓依賴性抑制作用，當50mV時對尾電流峰值的抑制率為（30.77±1.11）\%(n=5，P<,0.05)。
分離
為避免電流衰減（rundown）現象的影響，電極內液中加入ATP，並控制實驗在細胞破膜後25分鐘內完成。根據實驗設計，將配製好的藥物溶液，用恆流蠕動泵以2ml/分鐘速度向細胞灌流槽分別灌流，同時使用整負壓吸引裝置將廢液從灌流槽中吸除。記錄方法為破膜後穩定5分鐘記錄給藥前的電流值，給藥5分鐘後記錄藥物作用下的電流值。採樣後數據存貯在電腦硬碟內，供測量及分析用。為消除細胞間誤差，電流值以電流密度(pA/pF)表示。
用急性酶解法製備心室肌單個細胞。取大鼠用50mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉後，開胸取出心臟，在4℃無鈣Tyrode液中去除脂肪和心包膜，分離主動脈並插管，行Langendorff心臟灌流（圖1），速度為6～8ml/min。先以無鈣台氏液灌流3分鐘（灌注壓為20cm水柱），洗淨冠脈內血液，再用低鈣酶解液（CaCl2為0.05mmol/L低鈣台氏液,含Ⅱ型膠原酶0.4mg/ml，鏈蛋白酶E0.04mg/ml）循環灌流，大約20分鐘後，將心臟從Langendorff裝置上取下，置入室溫KB液中，剪去心房和基底部的組織，持眼科鑷將心室組織輕輕撕拉，用粗開口的吸管緩慢吹打，使心肌細胞從心肌組織上脫離，獲得單個心室肌細胞,上清液用120目的尼龍過濾網過濾，心肌細胞收藏在含KB液的試管中。整個灌流系統溫度保持在37℃，所有的灌流液和KB液均通以100\%的O2飽和30分鐘以上。將細胞在室溫下靜置半小時左右復鈣至0.25mmol/L，室溫保存備用。
吸取少許富含細胞的KB懸液於0.5ml的灌流槽中，靜置5～10分鐘，待細胞沉底附壁後，用100\%O2飽和的細胞外液實驗前吸取少許富含細胞的KB懸液於0.5ml的灌流槽中，靜置5～10分鐘，待細胞沉底附壁後，用100\%O2飽和的細胞外液進行表面灌流5～10分鐘，流速約2ml/分鐘。在倒置顯微鏡(OLYMPUS1×70)下選擇邊緣清楚、表面光滑、橫紋清晰、無收縮的細胞。實驗在22～24℃室溫下進行。採用Hamill等人的標準全細胞膜片鉗記錄方法，在電壓鉗制模式下記錄通道電流。膜片鉗放大器(Axopatch700B，美國Axon公司)，通過A/D和D/A數據轉換器（Digidata1322，美國Axon公司）同計算機相連線。刺激信號及電壓、電流輸入信號的採集均由軟體(pClampex10.0，美國Axon公司)控制。玻璃毛胚管(中國科學院物理所提供)經微電極拉制儀(p-97，美國Sutter公司)進行4步拉制而成，經拋光儀(MF-830，日本Narishige公司)拋光後尖端直徑2～3μm。充灌電極內液後入水電阻為1.5～3MΩ，補償液接電位後，調節三維操縱器(mhw-3，日本NARISHIGE公司)使電極尖端移向細胞表面，形成高阻封接(gigaseal)，封接電阻為1GΩ以上。補償快電容並吸破細胞膜形成全細胞記錄模式。電容測定時給予－10mV躍階的刺激，採用Cm=τ·Iss/△V求膜電容。調節慢電容補償和串聯電阻補償80\%～90\%以減少瞬時充放電電流和鉗位誤差。信號經截止頻率為1kHz的4階貝塞爾低通濾波器，採樣率為10kHz。
