試驗方法
溶血斑試驗 hemolytic plaque test,loca-lized hemolysis in gel assay
由傑尼(N.K.Jerne,1963)所創立的產生抗體細胞的直接計數法。原法是用羊紅細胞使小鼠免疫,按下述方法來計算脾臟中抗羊紅細胞的抗體產生細胞數。
實驗過程
將脾細胞和羊的紅細胞在45℃瓊脂液中作成懸液。並迅速平鋪在玻璃板上作成凝膠狀的薄層,在37℃的條件下培養1小時,結果從抗羊紅細胞產生抗體細胞放出的抗體在凝膠中擴散並與周圍的紅細胞相結合,此時再加上豚鼠的血清(補體)再經30分—1 小時的培養,由於和抗體結合的紅細胞溶血的結果,形成以抗體細胞為中心的小圓形的溶血斑(pla-que)。從這個溶血斑數和最初加到凝膠中的細胞數可計算出每單位細胞數的產生抗體細胞數。原法是以羊紅細胞作為抗原,但使用其它的紅細胞也可以。此外,使用紅細胞以外的蛋白質或多糖抗原,這些抗原吸附在紅細胞上也可得到同樣的溶血斑,因此,已成為研究多種抗原抗體產生的有力手段。