最上義定(1492年-1520年2月20日)是出羽的戰國大名。最上義淳的長男。通稱出羽太郎。官位是修理大夫。
永正元年(1504年),因為父親死去而成為山形城城主。同年進攻宿敵寒河江氏並令其降伏,但是在此時燒毀寒河江的慈恩寺。在永正9年(1512年)於莊內與武藤氏和砂越氏戰鬥,之後義定征服寒河江。還有迎娶了一族山野邊直廣的女兒等,最初有著極活躍的行動。
但是永正11年(1514年),伊達稙宗突然侵攻山形。以義定為中心聚集了天童氏、清水氏、延澤氏等各地最上氏有力支族、以及降伏的寒河江氏等,但是這支連合軍與稙宗在長谷堂戰鬥時敗北,岳父山野邊直廣和吉川政周(寒河江一族)戰死。翌年迎娶稙宗的妹妹並締結和議,以後受到伊達氏的影響力,最上氏的勢力開始衰退。義定在這樣的情勢下於永正17年(1520年)2月2日死去。戒名是雲照寺殿惟翁勝公大居士。墓所在山形縣山形市中野的雲祥院。
因為義定和伊達夫人之間沒有兒子,於是中野氏的義守被迎為當主。有說法指義定和山野邊夫人之間有兒子,不過因為伊達家為了把最上氏傀儡化而被退去。
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