基本介紹
硫胺素在體內的作用在於以羧化酶、轉羥乙醛酶系統的輔酶形式參加糖類代謝,是物質代謝和能量代謝中具有關鍵性的物質基礎。維生素B1還參與體內的氧化脫羧作用,為支鏈胺基酸代謝所必需。此外,維生素B1對促進食慾、胃腸道的正常蠕動和消化液的分泌等也有重要作用。
醫學檢查
檢查名稱
尿維生素B1
分類
體液和排泄物檢查 >尿液檢查
化驗取材
尿液
尿維生素B1的測定原理
維生素B1在鹼性鐵氰化鉀溶液中被氧化成噻嘧色素,在330~365nm光波激發下發出藍色螢光,在沒有其他螢光雜質干擾下,螢光強度與維生素B1成正比,但由於尿中雜質較多,故測定前必需經過離子交換劑處理。
試劑
(1)螢光分光光度計(或螢光計)。
(2)層析柱長80mm,內徑8mm。
(3)15%氫氧化鈉溶液。
(4)1%高鐵氰化鉀溶液,保存於棕色瓶中。
(5)鹼性高鐵氰化鉀溶液,取1%高鐵氰化鉀溶液1ml加15%氫氧化鈉14ml,混勻(臨用前配製)。
(6)2.5mol/L乙酸鈉溶液。
(7)乙酸溶液(pH值4.5)。
(8)酸性氯化鉀溶液,取濃鹽酸8.5ml,用25%氯化鉀溶液稀釋成1000ml。
(9)正丁醇(沸點114~118℃),若有螢光產生時,套用玻璃接口蒸餾器重蒸餾,收集沸點114℃部分。
(10)維生素B1貯存標準液(100mg/L),將維生素B1預置於含無水氯化鈣的乾燥器中24h,然後稱取10mg置於100ml量瓶中,用0.01mol/L鹽酸溶解成100ml,置4℃可穩定數月。
(11)維生素B1套用標準液(1000μg/L),取上述維生素B1貯存標準液1.0ml,用乙酸溶液(pH值4.5)稀釋成100ml,放4℃可穩定1周。
(12)硫酸奎寧貯存液(100mg/L),稱取硫酸奎寧100mg,用0.05mol/L硫酸溶解並稀釋成1000ml,盛於棕色瓶中,置4℃保存。
(13)硫酸奎寧套用液(300μg/L),吸取上述貯存液3.0ml,用0.05mol/L硫酸稀釋成1000ml,放4℃可穩定2~3月。
(14)活性人造浮石,人造浮石是一種矽酸鋁鈉陽離子交換樹脂,也稱為濾沙或軟水砂。將其通過80~100目篩孔,取其能在2min內沉澱到水溶液底部的產品。
活化方法:取人造浮石100g,在10倍於其容積的熱的3%乙酸中攪拌兩次,每次10min,再在5倍於其容積的熱的25%氯化鉀溶液中攪拌15min,然後再在熱的3%乙酸中攪拌10min,再用熱蒸餾水洗滌至氯離子呈陰性反應,同時檢測鐵離子,如含有大量鐵離子時,則用酸性氯化鉀溶液洗滌。全部攪拌過程可在大燒杯中進行,最後在布氏漏斗中抽乾,並在80℃下乾燥,保存在不漏氣的廣口玻璃瓶中備用。
操作方法
(1)收集24h尿液。
(2)裝柱:吸附柱下端裝以玻璃棉,加入水,繼加活性人造浮石,待全部下沉時,讓水流出。柱內人造浮石加量應為3.5cm高度,使其流速約為60滴/min。
(3)提純:
①取尿液10ml,調節pH值到4.5左右。
②將調好pH值的尿液倒入上述柱內,棄去濾出的尿液。
③用熱水約30ml,反覆洗柱,棄去濾出的液體,將柱插入25ml刻度管內,以便收集維生素B1洗脫液。
④柱內加入熱的酸性氯化鉀溶液25ml進行洗脫,收集的洗脫液冷卻後再用酸性氯化鉀溶液補足至總量為25ml。
⑤標準管及空白管的製備:方法同上,步驟①~④。標準液用量為3ml(1000μg/L),空白管用水10ml代替尿液。
(4)螢光生成:取試管5支標明樣品管(U)、樣品空白管(UB)、標準管(S)、標準空白管(SB)、空白管(B),按下表(表1)繼續操作。
(5)螢光測定:用螢光光度計時,激發波長為365nm,發射波長為435nm。用螢光計(如930型)時,激發波長為330nm,發射波長為450nm。先用硫酸奎寧套用液(300μg/L)使固定在某一讀數(一般為50~80),然後測定各管的螢光強度,並按下式計算出尿中維生素B1的含量。
24h尿中維生素B1=[(U-UB)-B]/[(S-SB)-B]×24尿量(ml)×0.3(μg)
正常值
0.17~1.70μmol/24h。
化驗結果臨床意義
降低:見於腳氣病、維生素B1缺乏、老年性痴呆、飲食不足、持久腹瀉、充血性心力衰竭、甲狀腺功能亢進症、多發性神經炎等。
升高:見於白血病、真性紅細胞增多症、淋巴瘤等。
附註
(1)在檢查前不宜過多服用維生素B1的藥物和食用富含維生素B1的食物,如動物內臟(肝、心、腎)、肉類、豆類、花生等。
(2)維生素B1尿液參考值:0.17~1.70μmol/d。
相關疾病
痴呆、腹瀉、充血性心力衰竭、甲狀腺功能亢進症、真性紅細胞增多症