基因間抑制 intergenic suppressor
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通過腺病毒載體介導CTLA4Ig在大鼠骨髓間質乾細胞(MSC)中的表達,探討MSC作為基因轉移靶細胞的可行性和轉染效率,研究其在體外對免疫應答的抑制作用。方法:構建含有CTLA4Ig基因的重組腺病毒載體pAd-CTLA4Ig,按照不同的感染倍率(MOI)轉染大鼠MSC,用螢光顯微鏡和流式細胞儀分析轉染效率,流式細胞術、Westernblotting等方法檢測目的蛋白CTLA4Ig在MSC中的表達。將轉基因MSC加入混合淋巴細胞反應(MLR)體系,觀察其抑制淋巴細胞增殖的生物學效應。結果:重組腺病毒載體pAd-CrLA4Ig對MSC的最大轉染率為80.7%±4.7%,轉基因MSC可檢測到目的蛋白的表達。基因修飾的MSC能有效抑制MLR體系中淋巴細胞的增殖,4d達到最大抑制效率51.46%;再次MLR證實這種抑制作用是供者特異性的。結論:MSC是一種較理想的基因轉移靶細胞,其表達的轉基因產物CTLA4Ig可在體外特異性地抑制免疫應答。