基因工程靶向細胞療法

基因工程靶向細胞療法

基因工程靶向細胞療法是目前國際上治療尖銳濕疣、生殖器皰疹疾病最先進、切實可行的生物免疫治療方法,它能夠特異性識別並殺滅HPV/HSV病毒,具有快速治癒,無復發,標本兼治等優點。基因工程靶向細胞療法治療尖銳濕疣、生殖器皰疹技術可以打破患者病部免疫抵制狀態。根據患者不同感染狀態和尖銳濕疣、皰疹病毒型別,先從患者體內提取部分單個核細胞,以特有技術賦予識別抗原的特異性,誘導患者自體免疫細胞增殖,然後再回輸到患者體內,高效靶向性殺滅血液中和細胞內的人類乳頭瘤病毒(HPV)、單純皰疹病毒(HSV)病毒。

步驟

將一種生物的DNA中的某個遺傳密碼片段連線到另外一種生物的DNA鏈上去,將DNA重新組織一下,就可以按照人類的願望,設計出新的遺傳物質並創造出新的生物類型,這基因工程一般包括四個步驟:

取得符合人們要求的DNA片段,這種DNA片段被稱為“目的基因”;

構建基因的表達載體;

將目的基因導入受體細胞;

目的基因的檢測與鑑定。

取得符合人們要求的DNA片段

要把目的基因從供體 DNA長鏈準確地剪下下來,可不是一件容易的事。1968年,沃納·阿爾伯、丹尼爾·內森斯和漢彌爾頓·史密斯第一次從大腸桿菌中提取出了限制性內切酶,它能夠在DNA上尋找特定的“切點”,認準後將DNA分子的雙鏈交錯地切斷。人們把這種限制性內切酶稱為“分子剪刀”。這種“分子剪刀”可以完整地切下個別基因。自1970年代以來,人們已經分離提取了 400多種“分子剪刀”。有了形形色色的“分子剪刀”,人們就可以隨心所欲地進行DNA分子長鏈的切割了。

構建基因表達載體

DNA的分子鏈被切開後,還得縫接起來以完成基因的拼接。1967年,科學家們在5個實驗室里幾乎同時發現並提取出一種酶,這種酶可以將兩個DNA片段連線起來,修復好DNA鏈的斷裂口。1974年以後,科學界正式肯定了這一發現,並把這種酶叫作DNA連線酶。從此,DNA連線酶就成了名符其實的“縫合”基因的“分子針線”。只要在用同一種“分子剪刀”剪下的兩種 DNA碎片中加上“分子針線”,就會把兩種DNA片段重新連線起來。

將目的基因導入受體細胞

把“拼接”好的 DNA分子運送到受體細胞中去,必須尋找一種分子小、能自由進出細胞,而且在裝載了外來的 DNA片段後仍能照樣複製的運載體。理想的運載體是質粒,因為質粒能自由進出細菌細胞,應當用“分子剪刀”把它切開,再給它安裝上一段外來的 DNA片段後,它依然如故地能自我複製。此方法適用於植物細胞的基因工程。此外,將目的基因導入動物細胞可選用顯微注射法,導入微生物細胞可以使用鈣離子(如氯化鈣)處理細胞使其可以吸收外界的DNA分子。

目的基因的檢測與鑑定

目的基因導入受體細胞後,是否可以穩定維持和表達其遺傳特性,只有通過檢測與鑑定才能知道。這是檢測基因工程是否成功的一步。

首先,要檢測轉基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因。方法是採用DNA分子雜交技術,即將轉基因生物的基因組DNA提取出來,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等做標記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,如果顯示出雜交帶,就表明目的基因已插入染色體DNA中。該方法因發現者而命名為“Southern”印記。

其次,還需要檢測目的基因是否轉錄出了mRNA,檢測方法同樣是分子雜交技術,與上述方法不同的是需從轉基因生物中提取mRNA,做上標記以進行檢測。由於Southern印記名稱的緣故,所以該方法被稱為“Northern”印記。

最後,檢測目的基因是否翻譯成蛋白質。方法是從轉基因生物中提取蛋白質,用相應的抗體進行抗原-抗體雜交,若有雜交帶出現,表明目的基因已經形成蛋白質產品。該方法又成為“Western”印記。

原理

基因工程靶向細胞療法治療尖銳濕疣、生殖器皰疹技術可以打破患者病部免疫抵制狀態。根據患者不同感染狀態和尖銳濕疣、皰疹病毒型別,先從患者體內提取部分單個核細胞,以特有技術賦予識別抗原的特異性,誘導患者自體免疫細胞增殖,然後再回輸到患者體內,高效靶向性殺滅血液中和細胞內的人類乳頭瘤病毒(HPV)、單純皰疹病毒(HSV)病毒。

原理圖原理圖

此種技術能夠高效減緩和阻止HPV、HSV病毒擴散進程,從內在消除

尖銳濕疣、生殖器皰疹患者生命之威脅。還可殺滅尖銳濕疣、生殖器皰疹病毒,使相當部分尖銳濕疣、生殖器皰疹患者在短時間內達到治療目標。也就是說,基因工程靶向細胞療法是通過患者本身健康的免疫細胞,通過體外誘導,再回輸會患者身體,實現自愈。因此基因工程靶向細胞治療是切實可行的技術手段,是目前最新、最好的生物治療方法。

跟蹤檢查

治療期間每月複查及HPV、HSV-DNA定量一次,治療結束後全面複查一次。

療程結束後隨訪1-3年,隨訪期間每半年做相關檢查一次。

套用前景

回顧基因工程的快速發展,基因工程所取得的多項成就令人興奮不已。北京武警總隊第二醫院對於基因工程靶向細胞治療技術成功的臨床運用更為生物學家們帶來信心。隨著科學技術的全面飛速發展,該項技術必將有極大突破,開展到更多醫學領域。對人類的健康產生及其深遠的影響。

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