內切核糖核酸酶介紹
核糖核酸酶A可特異地攻擊RNA上嘧啶殘基的3'端，切割與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵。反應終產物是嘧啶3'磷酸及末端帶嘧啶3'磷酸的寡核苷酸。無輔因子及二價陽離子存在時，核糖核酸酶A的作用可被胎盤RNA酶抑制劑(B1ackburnetal．1977)或氧釩—核糖核苷複合物(Puskasetal．1982)所抑制。
用途
(1)從DNA-RNA或RNA—RNA雜合體中去除未雜合的RNA區。
(2)確定DNA或RNA中單鹼基突變的位置(Myersetal．1985，Winteretal．1985)。在此方法中，RNA-DNA或RNA-RNA雜合體上的單鹼基錯配可被RNA酶A識別並切割。利用含SP5或T7噬菌體啟動子的質粒，在體外合成與野生型DNA或RNA互補的32p標記RNA探針，然後與待檢含單鹼基置換的DNA或RNA退火，所產生的單鹼基錯配可用RNA酶A切割，通過凝膠電泳分析切割產物的大小即可確定錯配的位置。在所有各種可能的單鹼基錯配中，大約50％可用此法確定。
