光親和標記
解釋
光親和標記對酶的活性部位、受體的結合位點進行特異標記的方法。試劑A-X的A基團和X基團可分別與不同的位點進行結合,從而將兩種物質交聯在一起。如用親和標記法分離細胞表面受體時,先將細胞與超量標記的激素(配體)混合,以飽和所有特異受體的激素結合位點；洗去多餘的激素,然後加入能夠與受體和配體結合的共價交聯劑將激素與受體進行共價交聯達到分離的目的。
親和標記指用對具有特異的親和性物質中導入化學反應基團的試劑，有選擇地修飾存在於活體高分子的對應結合部位的官能基。因根據親和標記的目的而設計的試劑，對相應的活體高分子具特異的親和性，故形成試劑與活體高分子的特異的複合體，結果在結合部位試劑之濃度特別高，因而結合部位的官能基得到良好的修飾。例如，對以芳香族胺基酸為特異的基質的胰凝乳蛋白酶，用基質類似物的TPCK（L-1-甲苯磺醯胺-2-苯乙基氯甲基酮）與之反應，則TPCK在苯丙氨酸之側鏈部分與胰凝乳蛋白酶進行特異的結合，在氯化甲酮部分反應，只是在活性部分存在的組氨酸殘基有選擇地烷基化。為了標記酶的活性中心。效應物的結合部位、抗體的抗原（或不全抗原）的結合部位、受體的激素或神經傳遞物質結合部位、植物外原凝集素的糖結合部位和核糖體的核酸結合部位等，分別設計出導入與之相應的活體分子化學反應基的試劑。最近基於這樣的目的，即從一般與化學試劑反應性低的殘基所結合的部位為特異標記，套用了導入在光照下獲得高度化學反應性的基團的活體分子類似物（光親和標記photoaffinitylabeling）。
套用
功能蛋白質組學的研究在藥物發現中扮演著重要的角色,而光親和標記技術是研究功能蛋白質組學的主要策略之一,它主要有兩個方面的套用:靶標蛋白的確定和活性小分子配體與靶標蛋白作用模式的揭示,這些信息為藥物的發現提供了強有力的支持.
經5步反應、以9%的總收率合成了一種含生物素修飾和光親和標記的異戊烯側鏈功能探針分子,初步考察了反應條件下該探針分子與SaccharomycescerevisiaeAS2.399粗蛋白的相互作用;生物素印跡分析結果表明,酵母中多種蛋白被探針分子修飾,為進一步開展化學蛋白組學研究奠定了基礎.
