dNTP

dNTP

dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(脫氧核糖核苷三磷酸)的縮寫。是包括dATP, dGTP, dTTP, dCTP,等在內的統稱,N是指含氮鹼基,代表變數指代A、T、G、C等中的一種。在生物DNA合成中,以及各種PCR(RT-PCR(reverse transcription PCR)、Real-time PCR)中起原料作用。

儲存液

dNTP溶於pH為7.0的NaOH貯存液中,最初的貯存液可稀釋到10mol/L,分裝後存放在-20℃冰櫃中。dNTP使用濃度在20~200 μmol/L之間。4種dNTP必須等濃度配合以減少錯配誤差。

使用濃度

在PCR反應中,使用低dNTP濃度,可減少非靶位置啟動和延伸時的核苷酸錯誤摻入。一般可根據靶序列的長度和組成來決定最低dNTP濃度。例如在100μl的反應體系中,4種dNTP的濃度為20μmol/L,可基本滿足合成2.6μg DNA或10pmol/L的400bp序列。

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