Transwell小室

Transwell小室這項技術的主要材料是Transwell小室(Transwell chamber,Transwell insert),其外形為一個可放置在孔板里的小杯子,不同廠家對Transwell會有不同的命名,而不同型號也可有不同形狀,不同大小,根據實驗需要,可有不同選擇。

名詞解釋

Trans-這個詞根有轉移、轉運、穿過等意思,well有小室的意思,可以從字面上理解,這是一類有通透性的杯狀的裝置,根據Corning公司的Transwell說明書中的介紹,可以認為這是一種膜濾器(Membrane filters),也可認為是一種有通透性的支架(permeable supports)。

介紹

更準確地說,Transwell應該是一種實驗技術,這項技術的主要材料是Transwell小室(Transwell chamber,Transwell insert),其外形為一個可放置在孔板里的小杯子,不同廠家對Transwell會有不同的命名,而不同型號也可有不同形狀,不同大小,根據實驗需要,可有不同選擇。但無論是何種外形,其關鍵部分都是一致的,那就是杯子底層的一張有通透性的膜,而杯子其餘部分的材料與普通的孔板是一樣。這層膜帶有微孔,孔徑大小有0.1-12.0µm,根據不同需要可用不同材料,一般常用的是聚碳酸酯膜(polycarbonate membrane)。

使用方法

將Transwell小室放入培養板中,小室內稱上室,培養板內稱下室,上室內盛裝上層培養液,下室內盛裝下層培養液,上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細胞種在上室內,由於聚碳酸酯膜有通透性,下層培養液中的成分可以影響到上室內的細胞,從而可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。

套用不同孔徑和經過不同處理的聚碳酸酯膜,就可以進行共培養、細胞趨化、細胞遷移、細胞侵襲等多種方面的研究。當然不同細胞其體積不同,具體選擇時要考慮到細胞大小。

套用

(1)共培養體系:小於3.0um孔徑條件下,細胞不會遷徙通過,因此,若研究不涉及細胞運動能力,不需要細胞穿過聚碳酸酯膜,則應選擇3.0µm以下孔徑。常用0.4、3.0µm。將細胞A種於上室,細胞B種於下室,可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的影響。

(2)趨化性實驗:可用5.0、8.0、12.0µm膜,上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室,計數進入下室的細胞量可反映下室成分對上室細胞的趨化能力。①細胞B對細胞A的趨化作用:將細胞A種於上室,細胞B種於下室,可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的趨化作用。②趨化因子對細胞的趨化作用:將細胞種於上室,下室加入某種趨化因子,可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。

(3)腫瘤細胞遷移實驗:常用8.0、12.0µm膜,上室種腫瘤細胞,下室加入FBS或某些特定的趨化因子,腫瘤細胞會向營養成分高的下室跑,計數進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。

(4)腫瘤細胞侵襲實驗常用8.0、12.0µm膜,原理與腫瘤細胞遷移實驗類似。

概括

Transwell侵襲實驗,其實原理簡單地說就是用一層膜將高營養的培養液和低營養的培養液隔開,細胞放在低營養的培養液里,為了找吃的,細胞會往高營養的培養液裡面跑,但是有膜擋著,所以要穿過膜才行。我們在膜上塗上一層基質膠,模仿細胞外基質,於是細胞要把基質消化了才可以從低營養的培養液跑到高營養的培養液裡面,最後我們檢測高營養的培養液里細胞量就可以知道細胞的侵襲能力了。

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