U0126

U0126是MAPK激酶MEK1和MEK2的高效選擇性抑制劑，IC50分別是72 nM和58 nM，比PD 98059的抑制活性高100倍左右。對大量其他的激酶如PKC, Raf, ERK, JNK, MEKK, MKK-3, MKK-6, Abl, Cdk2, MKK-4/SEK和Cdk4表現出非常弱或沒有抑制作用。

描述

U0126是一種有效，非ATP競爭性的MEK1 和MEK2抑制劑，IC50分別為70nM和60nM。U0126同時抑制活化形式和未活化形式的MEK1/2，而PD98059隻能抑制無活性狀態MEK1/2的激活。U0126以非競爭性方式同時抑制MEK1和MEK2活性,不僅在功能上拮抗AP-1轉錄活性，而且阻止了分別由erk2和erk1基因編碼的MAP激酶p42和p44被激活。MAPKp42/p44通過TLRs可參與LPS和其他脂類激發的信號級聯反應。

化學信息

別名：U0126-EtOH
CAS號：109511-58-2分子式：C18H16N6S2分子量：380.49SMILES:NC1=CC=CC=C1S/C(N)=C(/C(C#N)=C(SC2=C(C=CC=C2)N)\N)C#N.CCO純度：98.06%
外觀：白色固體溶解性：DMSO溶解配製儲存液（200mg/ml）
儲存條件：粉末直接保存於-20ºC，有效期2年；建議分裝後-20ºC避光保存，避免反覆凍存，至少可存放6個月。

生物活性

U0126是一種高度選擇性的MEK1/2抑制劑,IC50為0.07μM/0.06μM,作用於

U0126生物數據1

N3-S218E/S222DMEK比PD098059親和力強100倍。與MEK抑制劑PD098059(IC50為10μM)相比,U0126高親和力(高100多倍)作用於重組組成型激活的突變MEK1(DN3-S218E/S222D),IC50為72nM。與PD98059類似,U0126非競爭性抑制MEK,說明U0126結合在MEK的特定位點上。與作用於多種其他激酶,如PKC, Abl,Raf,MEKK,ERK,JNK,MKK-3,MKK-4/SEK,MKK-6,Cdk2,和Cdk4相比,U0126 更顯著高選擇性作用於MEK1和MKE2。

作用

抑制劑U0126對HepG2肝癌細胞影響

U0126生物數據2

體外培養人肝癌HepG2細胞,採用ERK通路激動劑和抑制劑:表皮生長因子(EGF)及U0126刺激48h,分別套用MTS法、劃痕實驗法及Transwell小室法檢測EGF和U0126對HepG2細胞增殖能力、遷移能力和侵襲能力的影響,qPCR和Western blot法分別檢測ERK mRNA和磷酸化ERK蛋白的表達變化。結果細胞增殖、遷移和侵襲實驗結果均顯示,激動劑EGF可顯著提高HepG2肝癌細胞的增殖、遷移及侵襲能力(P0.05),但可顯著下調ERK磷酸化蛋白的表達(P<0.01)。結論：ERK通路參與HepG2細胞的增殖、遷移和侵襲過程,EGF和U0126對以上指標的影響可能與ERKmRNA的表達及蛋白磷酸化過程相關。

U0126上調腦缺血再灌注損傷小鼠海馬MAP-2影響

健康昆明小鼠150隻,隨機分為假手術組、缺血再灌注組和U0126組,每組50隻,各組再根據缺血後再灌注的時間點細分為6、12、24、48和72h5個亞組。利用免疫組織化學方法和Western blot方法檢測MAP-2在各組小鼠海馬的表達變化,同時套用TUNEL法檢測各組小鼠海馬細胞的凋亡情況。結果與假手術組相比,缺血再灌注組小鼠海馬MAP-2的表達在6h時已經明顯降低,24h達最低值,而在72h略有回升(P<0.01);與相同時間點的缺血再灌注組小鼠相比,U0126組小鼠海馬MAP-2的表達明顯升高(P<0.01),而且海馬細胞的凋亡情況明顯好轉(P<0.01)。結論：U0126能夠上調腦缺血再灌注損傷小鼠海馬MAP-2的表達,減少腦缺血再灌注損傷海馬神經細胞的凋亡。

U0126抑制腸道病毒71型的複製

套用臨床診斷為手足口病的患兒皰疹液，通過易感細胞分離培養、RTPCR及序列測定，以及Western印跡技術等方法，成功分離到EV71臨床株.進一步用該分離株感染易感細胞，通過觀察宿主細胞pERK1/2蛋白磷酸化水平、病毒特異性衣殼蛋白VP1水平、病毒半數組織培養感染量（50% tissuecultureinfectious dose,TCID50），以及感染細胞的CPE等指標，以期揭示ERK通路在EV71複製的作用.結果表明，EV71的複製可引起細胞ERK通路的活化；而用MEK1/2特異性的抑制劑U0126預先抑制ERK通路的活化，可顯著地降低受染細胞上清液中的病毒的感染滴度（以TCID50表示）、受染細胞中EV71 VP1蛋白水平、受染細胞中EV71核酸水平，以及受染細胞的細胞病變效應(cytopathic effect,CPE).提示ERK信號通路的活化對EV71的複製具有重要的作用.本研究為進一步闡明EV71在宿主細胞內的複製機制、尋找新型抗病毒靶標等研究奠定了良好的基礎。