關係
![QPCR](/img/2/fe0/nBnauM3X3gDO0IDN0ADN3EzN0UTM5QjM3EzM0QTNwAzMxAzLwQzLyQzLt92YucmbvRWdo5Cd0FmLyE2LvoDc0RHa.jpg)
產品
第一代產品
基因擴增熱循環儀(DNAThermalCycler)+電泳儀+紫外分析儀+定性試劑,構成PCR定性檢測。
第二代產品
基因擴增熱循環儀+螢光儀+終點定量試劑,構成PCR-DNA終點法定量檢測(End-pointquantitativePCRdetection),又分為終點酶免定量( End-pointELISA-PCR)和終點螢光定量(End-pointFluor-PCR)兩種。
第三代產品
實時定量QPCR儀+實時螢光定量試劑,構成QPCR-DNA/RNA實時螢光定量檢測。
特點
QPCR至少有以下特點:
所用儀器少,只用一台儀器。
檢測時間短,只須45分鐘~1小時10分鐘(試劑各異),而定性PCR須3~4小時,酶免終點定量須6~8小時,螢光終點定量須2~3小時。
操作極其簡單:前處理後,樣本插入儀器一小時後到電腦上來出報告即可,無須開蓋,移樣本(以前方法),避免污染。
結果精確:定性PCR只能定性,很粗略,終點定量PCR由於只能在40個熱循環結束後檢測螢光,被測螢光達到飽和導致定量不夠精確,屬於半定量狀態。而實時螢光QPCR是在擴增的每時每刻連續檢測各樣本的螢光值的變化,如圖一所示:
圖一西安天隆TL988實際曲線1
檢測動態範圍:10~10000000000DNAcopies/ml
檢測精度:0.1RLU
辨別率:5000和10,000個模板拷貝樣本的辨別率99.7%。
現狀
實時螢光QPCR是當今世界用於臨床的最先進核酸分子診斷技術,被美國FDA承認並推崇,被美國FDA批准並取得臨床套用執照的QPCR試劑品種有:
B肝病毒(HBV),C肝病毒(HCV),愛滋病病毒(HIV),沙眼衣原體Chlamyditrachomatis(CT),性傳播疾病,淋病雙球菌Neiserriagonorrhea(NG),巨細胞病毒Cytomegalovirus(CMV),呼吸道疾病,結核分支桿菌Mybobacteriumtuberculosis(Mtb)等。