制定原因
往已有眾多的特定蛋白標準，為何還要有CRM－470？
1．自1967年起世界上已經公布了20餘種血漿蛋白國際參考標準。包括：IgG、A、M、D、E，白蛋白、銅藍蛋白、轉鐵蛋白、巨球蛋白、鐵蛋白、微球蛋白、C－反應蛋白，補體C、C、C、C、因子B等。
2．以往標準標示以人為指定的“國際單位（IU〕”表示，而且每個標準品復溶後造成體積差異，使用不便。這些和當前以表示的計量單位不具有可比性。
3．以往標準標定方法僅使用放射免疫擴散技術（RID），方法技術要求不嚴格。不適用於現有免疫比濁技術。
4．同一特定蛋白的不同批參考標準間有明顯差異。
5．各個標準只包含為數不多的特定蛋白參考標準，尚無一個較完整的多種蛋白標準。
6．在實際套用中，以往的國際標準不能解決特定蛋白免疫監測結果之間的可比性問題。
製備和定值要點
新的國際標準CRM－470的製備和定值要點是什麼？1．血漿蛋白測定國際標準化目標是使一個樣品在全世界得到一個相同的結果。為此要建立新的國際第二級具血清基體的參考品，用作14種血漿蛋白監測的參考，以後將有更多蛋白被定值。
2．1989年國際臨床化學學會（IFCC）會同美國病理學會（CAP），指定由Behling公司負責製備國際參考品。
3．收集來自法國、德國、瑞典、瑞士、英國的364名供血者血液。
要求
1〕 血液中無類風濕因子或單克隆組分；無黃疸、脂血、溶血；Hbsag,抗HIV，HTLVI，抗HCV及梅毒血清試驗均陰性。2〕 血清需及時分離冰凍，送Behling公司，經融化，去脂，加防腐劑，加純化CRP，加緩衝液，混勻除菌濾，最後分裝。
4．按照IFCC定值方案，統一使用指定的各特定蛋白純化標準為原始標準。避免各實驗室因使用的標準不一致造成定值差異。方案詳細規定了定值的操作程式以及統計方法。例如為確保在監測時各標準、樣品間無基體效應的差異和沒有抗原過剩，要求回歸線通過零點；標準和測定都須作多個稀釋（須以重量法校正），每個稀釋樣品作雙份檢測等。使27個定值實驗室（歐洲、美國、日本）步調一致，在規定期限內完成定值。
允許的測定方法為：免疫透射比濁，免疫散射比濁，放射免疫擴散。
5．本參考品涉及14種特定蛋白，參見表2中所列各種蛋白。
6．1992年歐洲經濟共同體的共同體參考局（Bureau Communitaire de Reference BCR）認可該參考品，並給予代號CRM－470（認可參考品470）。
正確使用
怎樣正確使用CRM－470作準確度傳遞？IFCC強調：
1．為使CRM－470可以使用較長時期，CRM－470隻提供給生產廠商，不直接用於一般實驗室。
2．CRM－470是以血清為基體的參考品，它只用於以血清為材料的商品化校準品的校準。
3．在進行數值傳遞（即廠商定值）時，實驗方案須和CRM－470定值方案一致。包括：兩個互相比較的材料作多次稀釋的測定；對樣品作多批雙份測定；用相應的統計方法等。
CRM－470對標準化有了哪些作用？
1．表1中列出的廠商都已簽署認可CRM－470作為他們公司的第一標準，推動了這些公司用戶結果的可比性。
2．對同一組白種成年人血清作參考值檢測，用上述公司產品得到的結果極其一致，說明特定蛋白檢測的質量有了顯著提高。結果見表2。
3．以往沒有兒童的參考範圍。現在使用CRM－470為第一標準的廠商產品系列，又得到了兒童的特定蛋白參考範圍（見表3）。
4．對尿液和腦脊液中這些蛋白的檢測質量也有了明顯改善。
5．近年來，其它非簽署公司要對自己的校準品定值時，已經形成採用上述公司的特定蛋白檢測系列（儀器、世紀、校準品），按照數值傳遞實驗方案（程式），對本公司校準品定值。然後再以病人樣品和認可的上述公司檢測系列作方法學比較，確認傳遞的可靠性，再將產品系列推向市場。
如何認識特定蛋白檢測的質量控制？
1．現有免疫比濁測定的質量三因素：抗原、抗體、基體。
2．確認樣品中被檢抗原和校準品中抗原的一致性。
3．製備試劑中抗體時使用的抗原和樣品中抗原的一致性。
4．試劑堅持使用多克隆抗體。抗體的純度、每批抗血清內各單克隆抗體的組成及相對比例保持恆定。
5．抗原抗體反應時所處的基體狀況保持恆定和一致。
6．正確的數據處理技術。
7．校準品穩定性、不混濁。
8．抗原過剩的識別。
表1同意上述參考範圍的廠商
Abion
Dako Diagnostica
Abbott
DADE Diagnostika
Bayer Diagnostics
Dupont
Bechman Instruments
Hoffmann-La Roche
Becton Dickinson
Human Gesellschaft Fur Biochemica
Behringwerke
Johnson & Johnson Clinical Diagnostics
Biokit
Merck Diagnostik
Bio Mereux
Orion Diagnostica
The Binding Site
Sanofi Diagnostics Pasteur
Boehringer Mannhein
Wako Chemicals
表2血清中14種蛋白，以CRM－470校準的白種成年人參考範圍
血清中蛋白
參考範圍（g/L）
白蛋白
35～52
a1抗凝蛋白酶
0.9～2.0
C3補體
0.9～1.8
C4補體
0.1～0.4
銅藍補體
0.2～0.6
C反應蛋白
<0.005
a1酸性糖蛋白
0.5～1.2
觸珠蛋白
0.3～2.0
IgA
0.7～4.0
IgG
7～16
IgM
0.4～2.3
a1巨球蛋白
1.3～3.0
前白蛋白
0.2～0.4
轉鐵蛋白
2.0～3.6
表3以CRM－470為校準品兒童的參考範圍
白蛋白
< 1歲
≥1歲
35～52
a1抗凝蛋白酶
3歲
≥3歲
0.9～2.0
C3補體
≤3個月
4～6個月
> 6個月
0.9～1.8
C4補體
≤3個月
4～6個月
> 6個月
0.1～0.4
銅藍補體
0～5
≥1歲
0.2～0.6
前白蛋白
0～4天
> 6歲
0.2～0.4
轉鐵蛋白
0～7天
> 1歲
2.0～3.6
IgA
新生兒
1～3個月
4～6個月
7～12個月
2歲
3～5歲
6～9歲
10～13歲
未檢出
0.05~0.5
0.08~0.8
0.3~1.4
0.3~1.2
0.4~1.8
0.6~2.2
0.7~2.3
IgG
新生兒
1～3個月
4～6個月
7～12個月
2歲
3～5歲
6～9歲
10～13歲
7.0~16
2.5~7.5
1.8~8.0
3.0~10
3.5~10
5.0~13
6.0~13
7.0~14
IgM
新生兒
1～3個月
4～6個月
7～12個月
2歲
3～5歲
6～9歲
10～13歲
0.1~0.3
0.1~0.7
0.2~1.0
0.3~1.0
0.4~1.4
0.4~1.8
0.4~1.6
0.4~1.5
