檢查前準備
向被檢測者解釋本操作的目的、方法等,消除顧慮;一般選取靜脈血進行檢測,採血前一天應清淡飲食、晚8點後避免進食和劇烈運動、避免飲酒以免影響結果,採血時避免情緒緊張。
操作方法
1.免疫組織化學染色法
(1)免疫螢光顯微技術:使螢光抗體與標本切片中細胞表面的CD8進行反應,洗滌除去游離的螢光抗體後,在螢光顯微鏡下觀察。
(2)免疫金銀染色技術:利用膠體金標記CD8對應的特異性抗體,通過免疫反應使膠體金顆粒沉積在抗原位置,加入銀顯影液,用對苯二酚將銀離子還原成銀原子,被還原的銀原子沉積在膠體金顆粒周圍形成“銀殼”,最終在光鏡下就能看到被放大的黑褐色物質。易於辨別陽性物質,而且能檢測微量的抗原。
2.流式細胞術
利用螢光素標記的CD8對應的單克隆抗體做分子探針,在流式細胞儀上檢測CD8的表達,計數CD8陽性細胞的百分率。
臨床意義
採用免疫螢光法進行檢測的正常值參考範圍為20%~30%。增高見於無丙球蛋白血症、病毒感染、慢性移植手術後排斥反應、結核病、真菌和原蟲感染等疾病;減低見於急性移植手術後排斥反應、系統性紅斑狼瘡、溶血性貧血、高IgE綜合徵、類風濕關節炎等疾病。