檢查前準備
向被檢測者解釋本操作的目的、方法等,消除顧慮;一般選取靜脈血進行檢測,採血前一天應清淡飲食、晚8點後避免進食和劇烈運動、避免飲酒以免影響結果,採血時避免情緒緊張。
操作方法
1.免疫組織化學染色法
(1)免疫螢光顯微技術:使螢光抗體與細胞表面的T淋巴細胞分化抗原進行反應,洗滌除去游離的螢光抗體後,在螢光顯微鏡下觀察。
(2)免疫金銀染色技術:利用膠體金標記T淋巴細胞分化抗原對應的特異性抗體,通過免疫反應使膠體金顆粒沉積在抗原位置,加入銀顯影液,用對苯二酚將銀離子還原成銀原子,被還原的銀原子沉積在膠體金顆粒周圍形成“銀殼”,最終在光鏡下就能看到被放大的黑褐色物質。易於辨別陽性物質,而且能檢測微量的抗原。
2.流式細胞術
利用螢光素標記的T淋巴細胞分化抗原對應的單克隆抗體做分子探針,在流式細胞儀上檢測T淋巴細胞分化抗原的表達,計數T淋巴細胞分化抗原陽性細胞的百分率。
臨床意義
1.CD1
在所有胸腺皮質中的胸腺細胞都可以檢測到CD1分子的表達,在激活的單核細胞和朗格漢斯細胞中也表達CD1。
2.CD2
在T細胞發育的早期階段表達,由於抗CD2單克隆抗體可以激活早期T淋巴細胞祖細胞,因此CD2抗原可能出現在功能性T細胞受體表達之前,是胸腺細胞激活中可以利用的一種受體。
3.CD3
在早期胸腺細胞和成熟T細胞中表達,與T淋巴細胞密切聯繫,這種抗原經常在急性T淋巴細胞白血病中表達, CD3陽性細胞降低見於如系統性紅斑狼瘡、類風濕關節炎等自身免疫性疾病。
4.CD5
在所有的T細胞上都可以發現CD5抗原,它出現在T淋巴細胞個體發育的早期階段,在外周血和臍帶血中B細胞的一些細胞亞群上也可以檢測到CD5的存在。
5.CD7
在T細胞個體發育的非常早期就會有所表達,但在T細胞成熟的最後階段這一抗原會丟失,CD7的功能還不清楚,單核細胞和NK細胞也表達這種CD7抗原。
6.CD4和CD8
在抗原激活T細胞時,CD4和CD8作為一種共同的受體,CD4也是人類免疫缺陷病毒的受體。CD4陽性細胞數/CD8陽性細胞數比值降低見於愛滋病、惡性腫瘤等;CD4陽性細胞數/CD8陽性細胞數比值增高見於自身免疫性疾病、變態反應性疾病、器官移植排斥反應等。
7.CD25
這種抗原表達在激活的T、B淋巴細胞上。
8.CD28
表達在靜止的T細胞上,CD28是環孢菌素抵抗的T細胞表面受體,與信號傳導途徑有關。
9.CD45
在所有的造血細胞中都有CD45的表達,缺乏CD45表達的T細胞對各種刺激都不會產生反應。