霍亂弧菌檢測

霍亂弧菌檢查常規方法是:直接塗片、染色檢查、動力觀察制動試驗。

正常值

未檢出霍亂弧菌。

臨床意義

異常結果:陽性結果的臨床分析:顯微鏡檢查可作為快速診斷的參考。革蘭染色鏡檢可見典型革蘭陰性弧菌。懸滴暗視野檢查可見穿梭樣活潑運動。免疫制動試驗陽性,具有重要參考意義。上述結果只能做出初步診斷,最後的確診仍需以培養結果為準。 陽性:見於霍亂。

需要檢測的人群:頻繁急劇腹瀉、嘔吐等懷疑為霍亂的病人。

注意事項

檢查時:

(1)、採集時請避免挖取沾到馬桶內尿液及自來水的部分;同時也請勿將糞便直接置於衛生紙或擦手紙上。

(2)、為避免干擾檢驗結果,請勿使用棉花棒挖取。

(3)、糞便採集量請勿過少,以避免無足夠的檢體以供檢驗。

(4)、若需要以化學法檢測糞便潛血時,請於採集前三天避免進食紅肉、肝臟及菠菜、甘藍、花椰菜等食物,以避免造成偽陽性結果。

(5)、若是以免疫法檢測糞便潛血時,您不需要限制飲食種類。

(6)、因為嬰幼兒不容易一次取到足量的檢體,若需要分次收集時,請將檢體暫時置於冰櫃冷藏保存,以避免細菌滋生。

不適宜人群: 沒有霍亂症狀的人。

檢查過程

一.採樣

1. 腹瀉患者樣本採集:

①水樣便采1~3ml,成形便取指甲大小量;

②肛拭子:生理鹽水浸濕采便管由肛門插入直腸內3~5cm處旋轉取出;

③嘔吐物采1~3ml。

2. 水樣及液體標本采相對靜止表層水(30cm內)500ml,其他液體標本採集500ml,2 ~3小時內送檢。

3.10-15隻蒼蠅作為一份標本。

4. 塗抹樣本採集

①2~3支無菌棉簽塗抹3~5隻以上水生動物表面、腮部及泄殖腔。

②2~3支無菌棉簽塗抹食品或物品表面(地溝口,下水管口,水池壁塗抹,餐盤內外側),直接放入10ml鹼腖水送檢。

二、動力及動力抑制試驗。

三、鹼性蛋白腖水(APW)增菌

①糞便、嘔吐物、肛拭子與APW比例1:5,鹼腖增菌同時接種慶大培養基;必要時可二次增菌;取菌膜下表層培養物0. 1~0. 2 mL轉種於10mL鹼性腖水管中作二次增菌;第一次增菌37℃培養6h~8h,第二次增菌37℃培養6h~8h.

②各種塗抹標本

鹼腖增菌同時接種慶大培養基;必要時可二次增菌;取菌膜下表層培養物0. 1~0. 2 mL轉種於10mL鹼性腖水管中作二次增菌;一次增菌37℃6-8h,二次增菌37℃6-8h.

③水樣和其他液體標本

十倍濃縮鹼腖增菌法:取450mL(調pH8.8-9.0)+ 50mL 10×APW;37℃培養(6 -8h);必要時可二次增菌。

④蒼蠅標本

研磨後全部於10mL鹼性腖水管中充分混勻37℃培養(6 -8h)。

四、取增菌液表面下的液體,劃線接種慶大平板37℃溫箱培養18-24h。

五、血清學檢查

①增菌接種慶大平板培養24小時後玻片凝集。

②凝集現象10-15秒可出現凝集,一分鐘內不出現凝集者,為陰性。做9-10個單菌落。注意弱凝集現象;小川稻葉均凝集時做試管凝集。

③如果凝集顆粒不好,取鹽水加菌兩個互相對照一起看。

六、分純:用接種環取抗原抗體複合物接種於普通營養瓊脂板上分純,37℃過夜培養

七、氧化酶試驗和菌種保存

①取營養瓊脂上菌落塗抹於有試劑的濾紙上,在30秒-1分鐘內出現紫藍色均為陽性;不變色或出現淺粉紅後很快褪色,均為陰性。

②用接種針取單個菌落穿刺半固體培養基。

相關疾病

非01霍亂弧菌腸炎,非霍亂弧菌感染,霍亂,霍亂樣綜合徵等。

相關症狀

腦細胞脫水,脫水熱,指紋皺癟,水瀉伴低血鉀,髓核脫水,代謝性酸中毒,脫水,急性腎衰竭等。

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