化驗名稱
中文名稱:血清總蛋白英文名稱:serumtotalprotein,STP
血清總蛋白(TP,TP0)介紹
血清總蛋白是血清固體成分中含量最多的一類物質,可分為白蛋白和球蛋白兩類,具有維持血管內正常膠體滲透壓和酸鹼度,運輸多種代謝物,調節被運輸物質的生理作用等多種功能,並與機體的免疫功能有著密切的關係,血清總蛋白水平主要反應肝臟合成功能和腎臟病變造成蛋白質丟失的情況,總蛋白檢測可間接了解機體的營養狀況,協助診斷某些疾病。
血清總蛋白測定抽取靜脈血,採用雙縮脲比色法測定,它是目前首先推薦的蛋白質定量方法,此法的原理是蛋白質分子中的肽鍵在鹼性條件下與二價銅離子(Cu2+)作用生成藍紫色的化合物,這種顏色反應強度在一定濃度範圍內與蛋白質含量成正比,經與同樣處理的蛋白標準液比較,即可求得蛋白質含量,此反應的優點是清,球蛋的反應性相近,操作簡單,重複性好,干擾物質少,為首選的常規方法,其缺點是靈敏度較低。
血清總蛋白(TP,TP0)正常值:
成人:60~80g/L。
早產兒:36~60g/L。
新生兒:46~70g/L。
註:各實驗室檢測方法不同,正常值各異。
血清總蛋白生理性波動,直立體位由於體液分布原因,血液相對濃縮,而長久臥床者血液較直立體位稀,因此長久臥床者血清總蛋白比直立活動時約低3~5g/L,新生兒血清總蛋白可比成人低5~8g/L,60歲以上的老年人約比成人低2g/L。
臨床意義:
血清總蛋白增高
(1)血液濃縮,導致總蛋白濃度相對增高:見於嚴重腹瀉,嘔吐,高熱時急劇失水,血清總蛋白濃度可明顯升高,休克時,由於毛細血管通透性增加,血液中水分滲出血管,血液可發生濃縮,慢性腎上腺皮質功能減退的患者,由於丟失鈉的同時伴隨水的丟失,血漿也可出現濃縮現象。
(2)血漿蛋白質合成增加:主要見於球蛋白合成增加,多發性骨髓瘤患者,巨球蛋白症,系統性紅斑狼瘡等。
血清總蛋白降低
(3)蛋白質合成障礙:如慢性肝炎,急性幹細胞壞死,肝硬化等。(4)血液稀釋,導致總蛋白濃度相對降低:如靜脈注射過多低滲溶液或因各種原因引起的鈉,水瀦留。
(5)攝人不足和消耗增加:食物中長期缺乏蛋白質或慢性胃腸道疾病所引起的消化吸收不良,因患消耗性疾病,如大失血,嚴重結核病,甲狀腺功能亢進,腎病綜合徵,長期營養不良,惡性腫瘤等,均可造成血清蛋白濃度降低。
(6)蛋白質丟失:嚴重燒傷時大量血漿滲出,大量失血,腎病綜合徵時大量蛋白尿,潰瘍性結腸炎時腸道長期丟失一定量的蛋白質,這些病理改變均可使血清總蛋白濃度降低。
60--80g/L(6.0--8.0mg/dl)
1.生理性升高:劇烈運動後。
2.生理性降低:妊娠。
3.病理性升高:(1)血清中水分減少,使總蛋白濃度相對增高。常見於急性失水引起血液濃縮(如嘔吐、腹瀉等);休克時,毛細血管通透性發生變化,血漿濃縮;慢性腎上腺皮質機能減退的病人,由於鈉的丟失繼發水分丟失,血漿也發生濃縮。(2)血清蛋白質合成增加(主要是球蛋白的增加)。總蛋白可超過100g/L,多見於多發性骨髓瘤病人。4.病理性降低:(1)血漿中水分增加,血漿被稀釋。因各種原因引起的水鈉瀦留或輸注過多的低滲溶液。(2)營養不良或長期消耗性疾病。如嚴重結核病和惡性腫瘤等。(3)合成障礙。主要是肝臟功能嚴重損害時,蛋白質的合成減少,以白蛋白的下降最為顯著。(4)蛋白質丟失。大出血時大量血液丟失;腎病時尿液中長期丟失蛋白質;嚴重燒傷時,大量血漿滲出等。
空腹12小時取靜脈血。
血清總蛋白測定方法
血清總蛋白測定一般採用雙縮脲比色法,它是目前首先推薦的蛋白質定量方法。此法的原理是蛋白質分子中的肽鍵在鹼性條件下與二價銅離子(Cu2+)作用生成藍紫色的化合物,這種顏色反應強度在一定濃度範圍內與蛋白質含量成正比,經與同樣處理的蛋白標準液比較,即可求得蛋白質含量。此反應的優點是清、球蛋的反應性相近,操作簡單,重複性好,干擾物質少,為首選的常規方法,其缺點是靈敏度較低。原理
血清(漿)中蛋白質的肽鍵(一CO—NH一)在鹼性溶液中能與2價銅離子作用生成穩定的紫紅色絡合物。此反應和2個尿素分
子縮合後生成的雙縮脲(H2N—OC—NH—CO-NH2)在鹼性溶
液中與銅離子作用形成紫紅色的反應相似,故稱之為雙縮脲反
應。這種紫紅色絡合物在540nm處有明顯吸收峰,吸光度在一
定範圍內與血清蛋白含量呈正比關係,經與同樣處理的蛋白質
標準液比較。即可求得蛋白質含量。
器材
分光光度計試劑
1.6mol/LNaOH溶液稱取NaOH2409。溶於新鮮製備的
蒸餾水約800ml中,定容至lL,貯於有蓋塑膠瓶中。
2.雙縮脲試劑稱取硫酸銅結晶(CuS04•5H,O)39溶乾
新鮮製備的蒸餾水500ml中,加入酒石酸鉀鈉(NaKC4H406•
4H,O,用以結合Cu2+,防止CuO在鹼性條件下沉澱)99和KI
(防止鹼性酒石酸銅自動還原並防止Cu20的離析)Sg。待完全
溶解後,在攪拌下加入6mol/LNaOH溶液100ml,並用蒸餾
水定容至1L,置塑膠瓶中蓋緊保存。此試劑室溫下可穩定半年,
若貯存瓶中有黑色沉澱出現,則需要重新配製。
3.60—709/L蛋白質標準液可用定值參考血清或標準白蛋
白作標準。
操作
取試管3支,混勻,置25℃30min或37℃10min,在波長540mm處比色,用空白管調零,鍘各管吸光度。
參考範圍
正常成人參考範圍為60~809/L。長久臥床者約低3~
59/L,60歲以上約低29/L,新生兒總蛋白濃度較低,隨後逐
月緩慢上升,大約1年後達成人水平。
注意事項
1.黃疸血清,嚴重溶血,葡萄糖,酚酞及溴磺酞鈉對本法有明顯干擾,故用標本空白管來消除。但如標本空白管吸光度
太高,可影響測定的準確度。
2。高脂血症混濁血清會干擾比色,可採用下述方法消除:
取2支帶塞試管或離心管,各加待測血清O.1ml。再加蒸餾水
0.5ml和丙酮10ml,塞緊並顛倒混勻10次後離心,傾去上清
液。將試管倒立於濾紙上吸去殘餘液體。向沉澱中分別加入雙
縮脲試劑及雙縮脲空白試劑,再進行與上述桕同的其他操作和
計算。
評價
1.雙縮脲顯色反應僅和蛋白質中肽鍵教成正比關係.與蛋白質的種類、分子量及胺基酸的組成無明顯關係,各種蛋白質
的顯色程度基本相同。
2.本法重複性好,RCV為4%,CCV為3.9%I線性範圍
為0~1409/L;本法干擾少,並且大多可以避免;使用單一的
穩定試劑,操作簡便、快速.既適於手工操作,也便於自動化
分析,已被推薦為測定血清總蛋白的參考方法。
3.唯一的缺點是靈敏度較低,比酚試劑法低約100倍。但
本法的檢出限為O.2一1.79/L,這相當於709/L的血清3~24
pl,已能滿足臨床生化檢驗的需要。
4.本法是臨床測定血清總蛋白質首選最方便、最實用的常
規方法。
5.臨床上常見的血清蛋白定量法主要有雙縮脲法、臨床折
射計法,染料結合法、BCA法和免疫比濁法。