療法介紹
蜂療抗癌是一種新的療法，利用蜂毒，蜂膠及中約材和其製劑殺傷癌細胞和調節機體免疫，從而起到抗癌作用。利用蜂毒、蜂產品抗瘤中醫調理，在殺傷腫瘤細胞的同時扶正固本，調理與治療相結合，相輔相成，最大程度的減輕腫瘤治療的毒副作用，為患者的康復保駕護航，蜂毒貯存在毒囊中，蟄刺時由蟄針排出。其化學成分比較複雜，包括多肽類、酶類和非肽類物質。主要有效成分是蜂毒素、蜂毒神經肽、磷脂酶A、透明質酸酶、多巴胺和組織胺等。其中，蜂毒素是蜜蜂毒的主要成分，約占蜂毒千重的50%。蜂毒素具有很高的生物活性，現代約理研究表明它具有抗炎、鎮痛、抑制血小板凝集、抗愛滋病及抗腫瘤等多種作用。近年來，有關蜂毒的抗腫瘤作用及其潛在的臨床套用價值日益引起人們的重視。蜂膠中含有大量胺基酸，對機體的免疫調節有重要作用。王漿中含有大量胺基酸和維生素及微量元素，抗腫瘤意義廣泛。療法治療機理
1、直接殺傷腫瘤細胞
套用胡蜂毒素對小鼠腫瘤模型(S)進行腫瘤殺傷作用和治療作用的實驗研究，發現胡蜂毒對小鼠腫瘤細胞有直接殺傷作用和一定的治療作用。蜂毒主要活性成分蜂毒素體外對多種實驗性腫瘤有具殺傷作用，並且l/μmol/L濃度的蜂毒素，阻止腫瘤細胞的增生，而不抑制正常細胞的生長和克隆率。通常認為蜂毒素使細胞線粒體膜溶解，使細胞的正常呼吸受到抑制，因而腫瘤組織氧化磷酸化的過程受到抑制，氧化功能被破壞，導致目腫瘤組織生長抑制。2、免疫調節作用
蜂膠是蜜蜂從植物芽孢或樹幹上採集的樹脂(樹膠)，混入蜜蜂口器中腺體的分泌物，再和花粉、蜂蠟加工製成的一種膠狀物質，是蜂巢的保護傘。一個5～6萬隻的蜂群一年只能生產蜂膠100-150克，被譽為“紫色黃金”蜂膠能增強巨噬細胞的吞食能力，和自然殺傷(NK)細胞的活性，也就是說，能提高機體的免疫功能。這是蜂膠起到保健作用的重要機制。蜂膠對感染性疾病的療效，一方面是通過抑制致病微生物的生長和繁殖，另一方面是通過提高機體的抗病能力，而最後起到消滅病原體，使病痛痊癒的作用。
1909年，Paulehrlich提出了免疫反應是機體對抗腫瘤的主要機制的概念。一般來說，人體免疫系統主要有三方面的功能，即防禦病原微生物感染的防護功能、消除體內“雜質”的自我穩定功能和對自身或受外界刺激所產生的各類變異細胞進行識別和殺滅的免疫監管功能。要實現上述功能，就必須使免疫系統處於相對平衡的穩定狀態，一旦平衡破壞，就可能導致疾病發生。
研究表明，蜂毒0.32、063mg/kg能增加加s肉瘤T淋巴細胞酯酶陽性染色率，表明具有增強T淋巴細胞功能的作用。蜂毒0.32mg/kg能增強s肉瘤網狀內皮系統(RES對碳粒廓清能力，具有增強RES單核巨噬細胞的吞噬功能作用。因此，蜂毒用於抗腫瘤治療，其機理與增強RE的吞噬功能和增強細胞免疫功能有關。蜂毒通過增強Thl細胞功能，對機體細胞免疫功能起正向調節作用，可能通過Th1類細胞，增強機體細胞免疫功能，因此利用蜂毒對免疫系統的免疫調節作用，開展蜂毒治療細胞免疫功能低下、腫瘤以及病毒感染等疾病具有重要意義。
此後，又研究了蜂毒對T淋巴細胞亞群的影響，結果表明蜂毒對T淋巴細胞亞群起著雙向調節作用，不管向哪個方向偏離，都呈現出回歸正常範圍的趨勢，而對T淋巴細胞亞群處於正常範圍的患者影響不大，認為蜂毒是理想的免疫調節劑。
3、誘導腫瘤細胞凋亡
腫瘤的發生、發展不僅是細胞增殖和分化異常的結果，也與細胞凋亡受阻有關。細胞凋亡(ApoptosiS)又稱程式性細胞死亡(ProgrammedeellDeath，PCD)，是細胞的一種不同於壞死的死亡方式，是細胞由基因控制的一種生理性死亡，同細胞的增殖、分化一樣，是由基因控制的主動的細胞生物學過程。近幾年來有關蜂毒及其主要成分蜂毒素抗腫瘤的機制研究取得了新進展，眾多研究發現蜂毒及蜂毒素的抗腫瘤生物活性是通過誘導腫瘤細胞凋亡實現的。蜂毒抑制人肝癌BEL一7402、乳腺癌細胞系MCF一7、T淋巴細胞白血病6T一CEM細胞生長並誘導其凋亡。Uwang等的研究表明，蜂毒能夠誘導人骨肉瘤細胞系MG一63細胞凋亡並抑制COX-2蛋白的表達。Jang等研究發現，蜂毒通過誘導人肺癌細胞系NCI-H1299細胞調亡抑制COX-2mRNA表達而發揮抗腫瘤作用。
蜂毒素誘導肺癌細胞凋亡與增加Bax蛋白表達、激活半胱氨酸蛋白酶有關。已有研究發現，蜂毒素能夠誘導視網膜母細胞瘤Y79細胞凋亡，但因其作用迅速，並不能排除其直接導致細胞壞死。最近的研究表明，蜂毒能夠體外抑制白血病U937細胞增殖並誘導其凋亡，其凋亡誘導作用可能是通過下調ERK和AKt信號轉導途徑實現的，並與Bcl-2的下調和caspase-3的激活密切相關。
療法作用
蜂毒素通過激活內源性磷脂酶D裂解人單核細胞性白血病細胞U937;插入K562細胞的胞膜形成孔道，引起Ca2+內流，通過升高胞內Ca2+濃度使細胞裂解;通過減少PCNA陽性細胞的表達，影響細胞周期的比率，來抑制肝癌細胞SMMC7721的生長、增殖;對HL60細胞有殺傷作用;對Hela細胞有殺傷作用;誘導神經角質瘤C6細胞HSP27和HSP70的表達;參與抗腫瘤T細胞應答。蜂毒通過直接殺傷腫瘤細胞、免疫調節及誘導細胞凋亡等方面達到抗腫瘤目的。蜂毒肽能作用於多種細胞內蛋白及酶類而影響細胞代謝功能。例如，與細胞內鈣調蛋白有很高的親合力，影響Ca2+轉導(Ekatefinaetal.，2004);通過提高肌漿Ca2水平而誘導骨骼肌收縮，作用機制：(1)使膜去極化，通過興奮-收縮偶聯過程間接提高Ca2+，並允許細胞外Ca2+沿化學梯度進入胞內;(2)直接作用於二氫吡啶受體激活興奮-收縮偶聯;(3)直接刺激Ca2+釋放或阻塞Ca2+吸收;(4)激活信號傳導(如PLC)過程(Raynoreta1.，1991;Brokxeta1.，2001)。蜂毒肽能激活細胞脂酶，使細胞大量釋放其產物而代謝異常(Koumanoveta1.，2003)。
研究資料顯示蜂毒素體外對多種實驗性腫瘤有殺傷作用。並且1μM濃度的蜂毒素，阻止腫瘤細胞的增生，而不抑制正常細胞的生長和克隆率。研究顯示：蜂毒素對人體肝癌細胞株Hep3B、hepG2和BEL-7402細胞24h的Ic值在32/μg/ml左右，而其中肝癌SMMC一7721細胞對蜂毒素較不敏感。兩株人正常肝臟組織來源的細胞以ChangLiver較為敏感，而蜂毒素對正常肝臟組織來源的L-02細胞抑制作用不明顯，揭示蜂毒素可能對正常肝組織的損傷較輕。
關於蜜蜂毒溶血活性肽(melittin)的抗腫瘤效果，近年來國外已有大量文獻報導，近年來發現melittin對多種腫瘤細胞具有很好的抑制效果，可通過多種細胞通路的作用而引起腫瘤細胞凋亡。本實驗體外實驗發現8μg/ml以上的melittin對於H22細胞具有較強的殺傷作用;並通過體內實驗發現melittin在體內同樣對H細胞具有較強抑制作用，能顯著提高腫瘤的存活時間以及抑瘤率(P<0.05)，並且隨著劑量的增加，抗腫瘤作用明顯增強。
直接使用蜂毒素作用於腫瘤細胞，蜂毒素通過多種機制對多種腫瘤細胞有強烈的殺傷作用。蜂毒素通過激活內源性磷脂酶D裂解人單核細胞性白血病細胞U937l1j;插入K562細胞的胞膜中形成孔道，引起Ca2+內流，通過升高胞內Ca2+濃度使細胞裂解;通過減少PCNA陽性細胞的表達、影響細胞周期的比率，來抑制肝癌細胞SMMC7721的生長、增殖;對HL-60細胞有殺傷作用;對HeLa細胞有殺傷作用;蜂毒素的作用也受細胞組織學來源的影響。研究發現蜂毒素在lμmol/L濃度時能阻止腫瘤細胞的增生而不抑制正常細胞的生長和克隆率。
將蜂毒素製成免疫毒素用編碼抗體片段(scFv)的基因和編碼蜂毒素的寡核苷酸構建成複合基因(svFv-ree1)，插入載體pPOW使其在大腸桿菌(TOP-P2)中表達。重組的免疫毒素克服了蜂毒素的非特異毒性，可通過對攜有抗原的靶細胞進行特異性結合來殺傷細胞，裂解細胞作用顯著大於蜂毒素，該法已成為一種有效的療法。
蜜蜂的王漿(royaljelly)是蜜蜂巢中培育幼蟲的青年工蜂咽頭腺的分泌物，是供給將要變成蜂王的幼蟲的食物。蜂王漿是高蛋白，並含有維生素B類和乙醯膽鹼等。具有強大的抗氧化功效。此作用是蜂王漿被大眾普遍肯定的作用，它對細胞的修復以及再生具有很強的作用。在蜂王漿中檢測出的超氧化歧化酶(SOD)是抗氧化的主要成分。蜂王漿能抑制癌細胞擴散，使癌細胞發育出現退行性變化，對癌症起到很好的預防作用。腫瘤細胞在體內被稱為“乞丐細胞”會不斷地向周圍組織索要營養，營養不足時，就會發生壞死;王漿中含有大量胺基酸維生素和微量元素，可以滿足腫瘤細胞的營養需求，使腫瘤細胞處於穩定狀態，這時集體的殺傷性細胞可以有效地將腫瘤細胞包圍殺滅。
因此，蜂療抗腫瘤機制應該是多方面的，除了誘導細胞凋亡、抑制細胞增殖外，抑制血管生成和調節免疫是蜂療抗腫瘤的另一重要途徑。蜂療抗癌已經成為一類新型治療方法，對於降低腫瘤的浸潤與轉移具有顯著療效。
