薄層層析基本操作技術

薄層層析法（TLC）是將吸附劑或支持劑均勻地鋪在玻璃板上，鋪成一薄層，然後把要分離的樣品點到薄層的起始線上，用合適的溶劑展開，最後使樣品中各組分得到分離。
（一）基本原理
在吸附薄層色譜過程中，展開劑是不斷供給的，所以在原點上溶質和展開劑之間的平衡不斷遭到破壞，即吸附在原點上的物質不斷地被解吸。此外，解吸出來的溶質溶解於展開劑中並隨之向前移動，遇到新的吸附劑表面，物質和展開劑又會部分地被吸附而建立暫時的平衡。
但立即又受到不斷地移動上來的展開劑的破壞，因而又有一部分物質解吸並隨展開劑向前移動，如此吸附～解吸一吸附的交替過程構成了吸附色譜法的分離基礎。吸附力較弱的組分，首先被展開劑解吸下來，推向前去，故有較高的Rf值；吸附力較強的組分，被扣留下來，解吸較慢，被推移不遠，所以Rf值較低
（二）吸附劑和展開劑的選擇
在吸附色譜中，展開劑的選擇一般應由實驗確定。溶劑的極性越大，則對同一化合物的洗脫能力越強，R，值增加。因此，如果用某一種溶劑展開某一成分，當發現它的R、值太小時，就可考慮改用一種極性較大的溶劑，或者在原來的溶劑中加人一定量的另一種極性較大的溶劑。
在吸附色譜法中，組分的展開過程涉及吸附劑、被分離化合物和溶劑三者之間的相互競爭，情況很複雜。到目前為止，還只是憑經驗來選擇。其基本原則主要有兩個：①展開劑對被分離組分有一定的解吸能力，但又不能太大。在一般情況下，展開劑的極性應該比被分離物質略小；②展開劑應該對被分離物質有一定的溶解度。
常用溶劑的極性次序為：
己烷＜環己烷＜四氯化碳＜甲苯＜苯＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙醋＜丙酮＜正丙醇＜乙醇＜甲醇＜水＜冰醋酸
（三）基本操作
1、薄層板的製備
（1）乾法鋪板（軟板）多用於氧化鋁薄層板的製備。
（2）濕法鋪板（硬板）可用於矽膠、聚酞胺、氧化鋁等薄層板的製備，但最常用的是矽膠硬板。
2、樣品的預處理