色譜檢測系統

檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號,常用檢測器有紫外吸收、螢光、示差折光、化學發光等。
1. 紫外可見吸收檢測器(ultraviolet-visible detector,UVD)
紫外可見吸收檢測器(UVD)是HPLC中套用最廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高,線性範圍寬,噪聲低,適用於梯度洗脫,對強吸收物質檢測限可達1ng,檢測後不破壞樣品,可用於製備,並能與任何檢測器串聯使用。紫外可見檢測器的工作原理與結構同一般分光光度計相似,實際上就是裝有流動地的紫外可見光度計。
(1)紫外吸收檢測器:
紫外吸收檢測器常用氘燈作光源,氘燈則發射出紫外-可見區範圍的連續波長,並安裝一個光柵型單色器,其波長選擇範圍寬(190nm~800nm)。它有兩個流通池,一個作參比,一個作測量用,光源發出的紫外光照射到流通池上,若兩流通池都通過純的均勻溶劑,則它們在紫外波長下幾乎無吸收,光電管上接受到的輻射強度相等,無信號輸出。當組分進入測量池時,吸收一定的紫外光,使兩光電管接受到的輻射強度不等,這時有信號輸出,輸出信號大小與組分濃度有關。
局限:流動相的選擇受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動相,每種溶劑都有截止波長,當小於該截止波長的紫外光通過溶劑時,溶劑的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收檢測器的工作波長不能小於溶劑的截止波長
(2)光電二極體陣列檢測器(photodiode array detector, PDAD):
也稱快速掃描紫外可見分光檢測器,是一種新型的光吸收式檢測器。它採用光電二極體陣列作為檢測元件,構成多通道並行工作,同時檢測由光柵分光,再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號,然後對二極體陣列快速掃描採集數據,得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(&61548;)函式的三維色譜光譜圖。由此可及時觀察與每一組分的色譜圖相應的光譜數據,從而迅速決定具有最佳選擇性和靈敏度的波長。
下圖是單光束二極體陣列檢測器的光路圖。光源發出的光先通過檢測池,透射光由全息光柵色散成多色光,射到陣列元件上,使所有波長的光在接收器上同時被檢測。陣列式接收器上的光信號用電子學的方法快速掃描提取出來,每幅圖象僅需要10ms,遠遠超過色譜流出峰的速度,因此可隨峰掃描。

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