自主複製型載體及其用途,它是由肝癌細胞特異的啟動子——甲胎蛋白基因的啟動子、EB病毒質粒型複製子及其反式作用因子、真核細胞抗性選擇標誌、和帶大腸桿菌複製子和氨苄青黴素抗性基因的大腸桿菌質粒骨架所組成。...
組建重組腺病毒伴隨病毒包裝系統的自主複製載體及套用
申請專利號CN96105366.6
專利申請日1996.06.05
名稱組建重組腺病毒伴隨病毒包裝系統的自主複製載體及套用
公開(公告)號CN1140201
公開(公告)日1997.01.15
類別化學;冶金
頒證日
優先權
申請(專利權)中國預防醫學科學院病毒學研究所
地址100052北京市宣武區迎新街100號
發明(設計)人顏子穎;侯雲德;張桐;王海林;舒躍龍
摘要
能用於組建腺病毒伴隨病毒包裝系統的自主複製型載體,它是由腺病毒伴隨病毒基因組編碼所有病毒蛋白基因的191—4484核苷酸序列元件EB病毒質粒型複製子及其反式作用因子、真核細胞抗性選擇標誌、和帶大腸桿菌複製子和氨苄青黴素抗性基因的大腸桿菌質粒骨架所組成。可作為助手包裝質粒轉染進入細胞表達AAV基因組編碼的蛋白以提供反式功能用於包裝攜帶外源基因的AAV病毒顆粒;也可以首先轉染進入細胞系,經抗性篩選構建AAV基因組以多拷貝附加子形式穩定存在並自主複製的AAV反式包裝細胞系,用於生產重組AAV病毒顆粒。主權項
能用於組建腺病毒伴隨病毒(Adeno-associatedvirus,AAV)包裝系統的自主複製型載體,其特徵在於由下列DNA元件組成:1,AAV病毒蛋白編碼序列:AAV基因組191--4484核苷酸;2,EB病毒質粒型複製子OriP及其反式作用因子EBNA-Ⅰ;3,真核細胞抗性選擇標誌(潮黴素B磷酸轉移酶基因);4,大腸桿菌質粒骨架(包括大腸桿菌複製子和氨苄青黴素抗性β內醯胺酶基因)。