其原理是:細胞損傷或死亡時胎盼藍染料可以穿過變形的細胞膜,與解體的DNA結合,使其著色。而活細胞能阻止這類染料進入細胞內。藉此可以鑑別死細胞和活細胞。除了胎盼藍常用的染料還有伊紅Y和苯胺黑等。
染料配製:4%的胎盼蘭母液,稱取4g胎盼藍,加入少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過濾,4℃保存。使用時用PBS稀釋至0.4%。
操作步驟:a 製備單個細胞懸液,並做適當稀釋(六次方個每毫升)。 b 染色:去九滴細胞懸液移至小試管內,加一滴0.4%胎盼藍溶液,混勻。 c 計數:在3分鐘內,用血球計數板分別計數活細胞和死細胞。
結果觀察:鏡下觀察,死細胞被染成淺藍色,而活細胞拒染。
細胞活力計算:(活細胞數/細胞總數)X100%
注意事項:用胎盼藍染色時,時間不宜過長,否則部分活細胞也會著色,從而干擾計數。
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