總谷胱甘肽測定試劑盒

總谷胱甘肽測定試劑盒的測定原理是:試劑盒中含有DTNB:5,5’–二硫代–雙–(2–硝基苯甲酸),能和谷胱甘肽(GSH)反應產生2–硝基–5–巰基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物(GSSG),由於2–硝基–5–巰基苯甲酸是一黃色產物,通過測定其在412 nm處的最大吸收可確定樣品中谷胱甘肽的含量。GSSG在谷胱甘肽還原酶作用下生成GSH,GSH又和DTNB作用生成2–硝基–5–硫基苯甲酸,利用這一循環反應可提高總谷胱甘肽測定的靈敏度。

簡介

谷胱甘肽(GSH)是一種硫醇(SH)化合物,它廣泛存在於動物組織、植物組織、微生物和酵母中。

總谷胱甘肽測定試劑盒含有多種試劑,測定總谷胱甘肽含量濃度範圍:1μM-100μM。

總谷胱甘肽測定試劑盒 總谷胱甘肽測定試劑盒

反應原理: (如圖)

總谷胱甘肽濃度的計算使用以下公式(a):

pseudo-end point法:

總谷胱甘肽=(O.D.sample-O.D.blank)/Slope(b)

kinetic法:

總谷胱甘肽=(Slope(c)sample- Slope(c)blank)/ Slope(b)

*(a)由於這個公式所得數值是處理後的樣品中總谷胱甘肽的量,如果需要知道細胞或組織中實際具體的谷胱甘肽的濃度,還需要做進一步的計算。由pseudo-end point法或kinetic法所製備的標準曲線的斜率。

(b)標準曲線的斜率

(c)kinetic反應的斜率

特點:

1、適合於比色分析;

2、可測定總谷胱甘肽(GSH+GSSG);

3、靈敏度高;

4、快速、省時,整個實驗可在30分鐘內可完成。

用途

可用於檢測細胞、組織、血漿、血清、紅血球、植物等樣品中的GSH;另外在樣品中加入triethanolamine和2-vinylpyridine,可單獨檢測二硫代谷胱甘肽(GSSG)的量。

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