紅細胞酶測定

紅細胞酶在調節紅細胞代謝中起重要作用,酶缺乏可導致能量供應減少,縮短紅細胞壽命,引起溶血性疾病,臨床上最重要的酶缺乏病是葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏和丙酮酸激酶缺乏。紅細胞酶測定對診斷酶缺乏病具有重要作用。

檢查前準備

準備好混合試劑,置-20℃冰櫃內保存,保存數月。

操作方法

1.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的螢光斑點試驗
(1)標本採集:乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na),ACD(枸緣酸、枸緣酸三鈉、葡萄糖)或肝素抗凝全血,若放4℃保存,可穩定1周;也可用肝素化毛細管從手指或足跟採取末梢血液。
(2)取3支小試管,標明患者、正常對照和陽性對照,向各管加入0.2ml混合試劑。分別向各管加入患者、正常和陽性的抗凝全血0.02ml,混勻後室溫放置。
(3)在反應0分鐘、5分鐘、10分鐘後,分別從各管吸出反應液1滴,置於新華1號濾紙上,使充分乾燥。
(4)在暗室內,用紫外線照射濾紙上的斑點,檢查是否有螢光。
2.丙酮酸激酶的螢光斑點試驗
(1)用肝素、EDTA或ACD抗凝患者和正常人血。
(2)以1000 r/min離心沉澱5分鐘,吸棄血漿和白細胞層。用生理鹽水配成20%的紅細胞懸液。
(3)取2支試管,分別加入0.2ml混合試劑,並加入患者和對照紅細胞懸液0.02ml,混勻,置於37℃水浴中。
(4)試液反應0分鐘、10分鐘、20分鐘、30分鐘、60分鐘後,分別取患者和對照的微量反應液,在1號濾紙上點樣。
(5)在紫外燈下觀察結果。

參考範圍

1.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的螢光斑點試驗
(1)正常人:0分鐘斑點無螢光,5分鐘和10分鐘斑點出現螢光,而10分鐘斑點螢光最強。
(2)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶部分缺陷者:5~10分鐘均出現很弱螢光。
(3)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏者:在5~10分鐘甚至10分鐘後均無螢光。
2.丙酮酸激酶的螢光斑點試驗
正常人螢光在30分鐘以後逐漸減少,甚至消失。

臨床意義

1.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺陷見於蠶豆病和伯氨喹啉型藥物性溶血貧血等。
2.丙酮酸激酶缺陷者螢光不消失或時間延長說明丙酮酸激酶缺乏,丙酮酸激酶缺乏症。

相關詞條

熱門詞條

聯絡我們