紅四唑TTC

菌落總數檢測添加方法:1%,1L培養基加1mL1%的TTC溶液。 在微生物培養結束後,向培養基表面噴灑1%TTC溶液適量,繼續培養1~2小時後計數。 在培養基滅菌後、使用前添加TTC溶液,然後再培養觀察。

簡介

中文名稱: 紅四唑
中文別名: 2,3,5-三苯基氯化四唑; 四氮唑紅
英文名稱: 2,3,5-Triphenyl-2H-tetrazolium chloride
分子式: C19H15ClN4
分子量: 334.80

性質

TTC是脂溶性光敏感複合物,劇毒,其溶液無色,對微生物的生長繁殖都或多或少具有抑制的作用,另外,TTC在高溫滅菌條件下會被嚴重破壞掉,從而導致染色效果明顯下降。 TTC染色是TTC和活細胞線粒體內的琥珀酸脫氫酶反應,生成紅色的三苯基甲臢(TTF),用來表示細胞的活力或者計數。存放或染色時要避光,37度條件下。

套用

鮮乳中抗生素殘留量檢測

添加量:4%
配製方法:稱取1gTTC,溶於5mL滅菌蒸餾水中,裝褐色瓶內於7℃冰櫃保存,臨用時用滅菌蒸餾水稀釋至5
倍。如遇溶液變為玉色或淡褐色,則不能再用。
判斷標準:觀察時要迅速,避免光照過久發生干擾。乳中有抗生素存在,則檢樣中雖加菌液培養物,但因細菌的繁殖受到抑制,因此指示劑TTC不還原,不顯色。與此相反,如果沒有抗生素存在,則加入菌液即行增殖,TTC被還原,顯紅色,也就是說檢樣呈乳的原色時為陽性,呈紅色為陰性。

菌落總數檢測

添加方法:1%,1L培養基加1mL1%的TTC溶液。
添加方法:
方法(一) 在微生物培養結束後,向培養基表面噴灑1%TTC溶液適量,繼續培養1~2小時後計數。注意TTC溶液是不需要無菌的,因為1小時之內是不可能生長出肉眼可見菌落的。
方法(二) 在培養基滅菌後、使用前添加TTC溶液,然後再培養觀察。
作用:TTC能使菌落顯紅色,易於區分菌落和樣品固態殘渣,方便計數。

測定種子活力

添加量:0.5%
使用方法:
1. 浸泡 將待測種子在 30 ~ 35 ℃溫水中浸種(大麥、小麥 6 小時,玉米 5 小時左右),以增強種胚的呼吸作用。
2. 顯色 取吸脹的種子 200 粒,用刀片沿種子胚的中心線縱切為兩半,將其中的一半置於 2 只培養皿中,每皿 100 個半粒,加入適量的 0.5% TTC 溶液,以覆蓋種子為度。然後置於 30 ℃恆溫箱中 1 h 。觀察結果,凡胚被染為紅色的是活種子。 將另一半在沸水中煮 5 min 殺死胚,作同樣染色處理,作為對照觀察。
3. 計算活種子的百分率
判斷標準:可被種子中的還原性物質(脫氫酶)還原為紅色的TTF,使活種子胚著上紅色而胚乳不被染色,而死種子完全不被染色。

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