粘粒(Cosmid)實際是質粒的衍生物,是帶有cos 序列的質粒。 cos序列是λ噬菌體 DNA 中將 DNA 包裝到噬菌體顆粒中所需的 DNA 序列。粘粒的組成包括質粒複製起點(colE1),抗性標記(ampr), cos 位點,因而能象質粒一樣轉化和增殖。它的大小一般 5-7kb 左右,用來克隆大片段 DNA ,克隆的最大 DNA 片段可達 45kb 。有的粘粒載體含有兩個 cos 位點,在某種程度上可提高使用效率。
二、粘粒載體的工作原理
粘粒克隆的主要原理類似λ噬菌體載體。在外源片段與載體連線時,粘粒載體相當於λ噬菌體載體的左右臂,cos 位點通過粘端退火後,再與外源片段相間連線成多聯體。當多聯體與λ噬菌體包裝蛋白混合時,λ噬菌體 A 基因蛋白的末端酶功能將切割兩個 cos 位點,並將兩個同方向 cos 位點之間的片段包裝到λ噬菌體顆粒中去。這些噬菌體顆粒感染大腸桿菌時,線狀的重組 DNA 就象 λ噬菌體 DNA 一樣被注入細胞並通過 cos 位點環化,這樣形成的環化分子含有完整的粘粒載體,可象質粒一樣複製並使其宿主獲得抗藥性。因而,帶有重組粘粒的細菌可用含適當抗生素的培養基挑選。通過這種方式,就將外源 DNA 片段通過粘粒載體克隆到大腸桿菌中了。
與λ噬菌體載體不同的是,外源片段克隆在粘粒載體中是以大腸桿菌菌落的形式表現出來的,而不是噬菌斑。這樣所得到的菌落的總和就構成了基因文庫。
上述帶有外源片段的重組粘粒,可再次包裝到噬菌體顆粒中去。通過輔助λ噬菌體的感染或誘導潛伏原噬菌體的生長,重組粘粒的 cos位點可作為包裝的底物,導致重組粘粒 DNA 被包裝到噬菌體顆粒中去。這些轉導性顆粒從細胞中釋放出來,既可無限期貯存,也可直接感染其他菌株。
相關詞條
-
粘粒
一種克隆載體,由質粒pBR322和l噬菌體的 cos粘性末端構建而稱成。
簡介 相關條目 -
黏粒克隆載體
40Kb左右的外源DNA片段。 由於黏粒載體帶有噬菌體的包裝序列,可以用包裝蛋白包裝,不帶外源DNA片段的載體因為包裝下限而不能被包裝,具有很強選擇性。...
-
基因工程載體
按人們的意願去有目的地改造,創建生物遺傳性,因此其最基本的工程就是要得到目的基因或核酸序列的克隆。分離或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖,需要載體攜帶它...
定義 理想載體要求 質粒載體 噬菌體載體 動物病毒載體 -
塑膠造粒
塑膠造粒是塑膠機械加工的一種工藝,在塑膠造粒的過程要根據機器的性能和實踐摸索,掌握技巧,才能不斷提高塑膠製品的質量和工藝。
技巧 設計因素 注意事項 加熱溫度 主機的轉速 -
滾轉法制粒
制粒制粒指往粉末狀的藥料中加入適宜的潤濕劑和粘合劑,經加工製成具有一定形狀與大小顆粒狀物體的操作。 (二)高速攪拌制粒藥粉、輔料、粘合劑,用高速鏇轉攪拌...
基本簡介 相關詞條 相關連結 -
擠出制粒
擠出制粒指往粉末狀的藥料中加入適宜的潤濕劑和粘合劑,經加工製成具有一定形狀與大小顆粒狀物體的操作。
藥品簡介 相關詞條 相關連結 -
富鋁土
淋失作用十分強烈。粘粒礦物組成中以1∶1型高嶺石類粘土礦物和鐵鋁氧化物...的土壤粘粒部分具有較低的陽離子交換量和矽鋁分子率。CECpH7/粘粒...土壤粘粒部分的陽離子交換量或矽鋁分子率的高低與富鋁化作用的程度並不完全...
地理分布 成土條件 成土過程 主要性狀 形態特徵 -
購物袋專用填充母粒
產品特性 產品優勢 產品用途
-
矽膠
這一共性,但具體到某一類型膠,又有工藝各異,相 互區別的個性。凝膠造粒過程凝膠造粒是矽膠生產的關鍵性步驟之一,是指一定濃度的稀泡花鹼液和稀硫酸...
簡介 物理特性 性能對比 辨別真假 分類