甘露糖陽性選擇系統

傳統的篩選方法是利用抗生素和除草劑類選擇劑,但這些物質對人類和環境的影響還不完全了解,因此,非抗生素篩選系統應運而生。 甘露糖陽性選擇系統屬於非抗生素篩選系統之一,其原理是:甘露糖不能維持各種外植體的生長。 正向選擇法不使用抗生素和除草劑基因,作為環境友好的選擇系統,它可能在轉基因植物研究中具有潛在的、廣泛的套用前景。

植物遺傳轉化的轉化頻率通常較低,篩選時必須利用選擇標記來保證轉化細胞的存活和防止非轉化細胞的再生。傳統的篩選方法是利用抗生素和除草劑類選擇劑,但這些物質對人類和環境的影響還不完全了解,因此,非抗生素篩選系統應運而生。
甘露糖陽性選擇系統屬於非抗生素篩選系統之一,其原理是:甘露糖不能維持各種外植體的生長。當培養植物細胞添加甘露糖時,它只被轉化為6-磷酸甘露糖,不能進一步參與代謝,而積累至毒性水平。科學家克隆編碼6-磷酸甘露糖異構酶的基因作選擇基因,構建表達載體遺傳轉化植物,用甘露糖作選擇劑,選擇基因編碼的6-磷酸甘露糖異構酶則可將6-磷酸甘露糖轉化為易於糖酵解的6-磷酸果糖。
和傳統的遺傳轉化方法相比,包含甘露糖選擇在內的新篩選方法有利於轉基因組織的再生和生長,同時使非轉基因組織因飢餓而死,而不是殺死它們,稱之為正向選擇法;傳統的抗生素選擇法或除草劑選擇法將未轉化細胞殺死則被叫做負向選擇法。正向選擇法中高濃度的甘露糖、木糖等可導致相當大的植物毒性,但由於轉基因細胞嵌合於壞死組織,在適當的選擇劑
濃度時,外植體全部壞死較少,可望提高轉基因苗的發生率。正向選擇法不使用抗生素和除草劑基因,作為環境友好的選擇系統,它可能在轉基因植物研究中具有潛在的、廣泛的套用前景。

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