烯脂醯輔酶A

目的:製備小鼠抗人烯脂醯輔酶A水解酶（enoylCoAhydratase,ECHS1）的單克隆抗體（mAb）並進行初步鑑定。方法:將正常成人肝組織勻漿離心並分離線粒體,用線粒體總蛋白免疫BALB/c小鼠,採用雜交瘤技術製備mAb,並通過間接ELISA、Westernblot、免疫沉澱、免疫組化和間接免疫螢光等方法對mAb進行特異性鑑定,通過uni-ZAPXR正常成人肝臟cDNA表達文庫篩選鑑定抗原。

【摘要】目的:製備小鼠抗人烯脂醯輔酶A水解酶（enoylCoAhydratase,ECHS1）的單克隆抗體（mAb）並進行初步鑑定。方法:將正常成人肝組織勻漿離心並分離線粒體,用線粒體總蛋白免疫BALB/c小鼠,採用雜交瘤技術製備mAb,並通過間接ELISA、Westernblot、免疫沉澱、免疫組化和間接免疫螢光等方法對mAb進行特異性鑑定,通過uni-ZAPXR正常成人肝臟cDNA表達文庫篩選鑑定抗原。結果:獲得1株可穩定分泌抗人ECHS1mAb的雜交瘤細胞株BGB095。該mAb的Ig亞類(型)為IgG1（κ）,可用於ELISA檢測、Westernblot、免疫沉澱、免疫組化等實驗。結論:成功製備了抗人ECHS1的mAb,為代謝疾病和腫瘤的研究提供了有力的工具。

【關鍵字】ECHS1單克隆抗體線粒體

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