概述
木犀草苷Luteoloside， ；Luteolin-7-O-glucoside ；Cynaroside；
.2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5-hydroxy-4-oxo-4H-chromen-7-yl beta-D-glucopyranoside
CAS No.：5373-11-5
純度98%以上，檢測方法HPLC。
別名：木犀草素-7-O-葡萄糖苷（Luteolin-7-O-glucoside）；青蘭苷（Cynaroside）
金銀花為常用中藥，來源於忍冬科植物忍冬(LonicerajaponicaThunb．)的乾燥花蕾或帶初開的花，具有清熱解毒、散風消腫的功能。中國藥典2000年版一部該品種項下測定綠原酸的含量，2005年版新增了高效液相色譜法測定有效成分木犀草苷的含量，而文獻報導測定木犀草苷的方法¨也主要是高效液相色譜法，採用c。柱，流動相分別為乙腈～0．5％醋酸溶液、乙腈一0．04％磷酸溶液、乙腈一0，5％磷酸溶液梯度洗脫；甲醇一乙腈一0．4％磷酸溶液等度洗脫。在樣品檢驗中發現，使用c。柱測定時樣品色譜圖中木犀草苷色譜峰的前後均有小峰干擾。調整流動相比例亦無法使三者的分離度達到1．5，不符合藥典要求，很難對金銀花中所含的木犀草苷進行準確定量。本文採用C柱，以0．4％磷酸溶液一四氫呋喃一甲醇(79：11：10)為流動相，較好地對金銀花中木犀草苷進行分離測定。
分子式：
C21H20O11 ；
分子量：448.3769
性狀：
黃色粉末；微溶於水、甲醇、乙醇，可溶於熱水、熱甲醇及乙醇，不溶於氯仿、乙醚、苯、石油醚等極性小的溶劑。
熔點：254-256℃。
紫外最大吸收： 255，350（nm）。
儀器與試藥
日本島津LC一2010高效液相色譜儀，Phenome—flexLunaC8(250mm×4．6mm，5Ixm)，紫外光譜測定用島津2550型單光束紫外分光光度儀。
木犀草苷對照品(中國藥品生物製品檢定所，供含量測定用，批號：117720—200501)。
金銀花葯材為市場抽驗樣品(批號：070901，0700902，070801，20070818，070701，20070401，070711)。水為去離子水，乙腈、四氫呋喃為色譜純，磷酸為分析純。
溶液製備
2．1對照品溶液精密稱取木犀草苷對照品21．37mg，置50mL棕色量瓶中，加70％乙醇製成427．4Ixg·mL對照品儲備液。取木犀草苷對照品儲備液2mL於25mL量瓶中，加70％乙醇稀釋至刻度，再取稀釋溶液3mL於10mL量瓶中，加70％乙醇稀釋至刻度，製成10．26lxg·mL的對照品溶液。
2．2供試品溶液取本品粉末(過4號篩)1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加人70％乙醇50mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率33kHz)1h，放冷至室溫，再稱定重量，用70％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
色譜條件
色譜柱：用辛基矽烷鍵合矽膠柱PhenomenexLuna—C8(250mill×4．6mm，5lxm)；流動卡目：0．4％磷酸溶液一四氫呋喃一甲醇(79：11：10)；流速：1mL·min～；檢測波長為350nm；柱溫：30cC；進樣量：10lxL。在本色譜條件下，理論板數以木犀草昔峰計不低於7000。
專屬性考察
精密吸取對照品溶液及供試品溶液各10L，注人液相色譜儀，記錄色譜圖，見圖1。結果樣品色譜圖中木犀草苷峰與前後峰的分離度分別為2．89和1．99，符合高效液相色譜定量分析的要求。理論塔板數以木犀草苷計為9000以上。
線性關係考察
取濃度為427．4lxg·mL一的對照品儲備液適量，加70％乙醇配製得170．96，85．48，34．192，17．096，10．2576，8．568，3．4272，1．7138，0．8568lxg·mL一的系列對照品溶液，搖勻，分別進樣10L。以進樣量()為橫坐標，峰面積積分值y為縱坐標，繪製標準曲線，求得回歸方程為：
Y：2．465×10X+2．332×10r=0．9999
表明木犀草苷進樣量在0．86—427．4lxg的範圍內線性良好。
精密度試驗
精密吸取對照品溶液(10．26lxg·mL)10L，按上述色譜條件，連續進樣6次，測得平均峰面積為934176，RSD為0．71％。結果表明儀器分析的重複性良好。
供試品溶液的穩定性
精密吸取供試品溶液(批號20070401)10lxL，分別於0，3，6，9，12，15，18，24h進樣測定，測得樣品中木犀草苷的平均峰面積(n：8)為326649，RSD為1．2％。結果表明，供試品溶液在24h內穩定。
重複性試驗
取同一批次(批號20070401)的供試品約0．5，1，1．5g，精密稱定，按“2．1．2”項下方法製備供試品溶液，進行含量測定。木犀草苷含量的平均值為0．057％，RSD為1．4％。結果表明此法重複性良好。
回收率試驗
取同一批已知含量(批號20070401)的樣品(過4號篩)0．5g，共9份，每3份為一組，每組分別精密加人對照品溶液(427．4lxg·mL)1．6，2．2，2．8mL。按“2．1．2”項下方法製備所需溶液，在上述色譜條件下進行含量測定，計算回收率(n=3)。結果木犀草苷低、中、高3種濃度的回收率分別為98．50％，99．37％，102．76％；RSD分別為0．69％，0．16％。0．15％。
樣品測定
取不同產地的7批樣品各2份，按“2．1．2”項下方法製備供試品溶液，按上述色譜條件每份溶液分別進樣2次，進行測定，按外標法計算，結果見表1。
討論
採用C柱，對流動相進行選擇：首先採用中國藥典金銀花項下流動相系統(乙腈一0．5％醋酸溶 液)，但效果不理想；採用文獻報導的流動相系統：乙腈一0．04％磷酸溶液、乙腈一0．5％磷酸溶液、甲醇一乙腈一0．4％磷酸溶液、0．4％磷酸溶液～四氫呋喃一甲醇，結果目標檢測峰木犀草苷與前後峰的分離度均小於1．5，不符合藥典規定。在流動相系統改變未能達到目的的情況下，實驗中純化供試品溶液，以期減小其他雜質對目標檢測峰的影響：樣品用70％乙醇超聲提取後蒸乾、水溶，分別用乙酸乙酯、水飽和的正丁醇提取、通過聚醯胺柱洗脫、通過D101大孔樹脂柱洗脫的方法進行純化，結果未能得到有效改善，液相色譜圖中目標檢測峰的分離度仍然達不到1．5。
進一步對色譜柱進行篩選，分別採用C柱(AgilentSB—Cl8；PhenomenexODS一3；依利特Kro—masilCl8)、辛基矽烷鍵合矽膠柱(PhenomenexLuna—C8；AgilentSB—C8)、苯基柱(AgilentSB—Pheny1)對供試品溶液(按中國藥典方法製備)作色譜分離(採用中國藥典金銀花項下流動相系統)，結果以C柱的分離效果較好，目標檢測峰的分離度基本達到1．5；再對流動相系統及供試品溶液製備方法進行最佳化，最終確定了採用本文的流動相系統及溶液製備方法效果最佳。
存在問題：由於目標峰附近的小峰可能與目標峰化合物結構相似，按照2005年版中國藥典規定的方法無法使目標峰呈單峰狀態分離，要么與前面小峰相連，要么與後面小峰相連，以致不能準確定量，實驗中反覆篩選，最終選擇出能使目標峰與前後小峰完全分離的條件，即文中敘述條件，存在的缺陷是保留時間較長，達47．7rain，這將在我們今後的工作中進一步研究、改善。
常見用途
1、呼吸系統作用： 木犀草苷有較強的呼吸道殺菌作用，它是新疆特有藥材青蘭中治療氣管炎的主要有效成分。
2、心血管作用： 降低膽固醇在動脈粥樣硬化中的作用，增強毛細血管的舒張作用。
3、中樞系統作用： 在實驗中發現，木犀草苷可以緩解苯
金銀花是我國傳統中藥材，它的作用廣泛，有較強的殺菌消炎，解熱鎮痛的功效。金銀花屬於忍冬科，按2005版中國藥典規定，金銀花中的標誌性成分是綠原酸和木犀草苷，而是否含有木犀草苷是區別正品金銀花和同科的山銀花、忍冬藤的主要化學指標，也是正品金銀花與山銀花等同科植物在療效上的差異的主要原因。
