標本採集
對懷疑肺炎支原體感染的患者採集痰、咽拭子、鼻咽洗液和支氣管分泌物。立即送檢和接種。不能及時接種的標本，應放置4℃保存並於24小時內接種。
培養條件
支原體的營養要求比一般細菌高，除基礎營養物質外還需加入10%～20%人或動物血清以提供支原體所需的膽固醇和酵母。支原體的最適pH 7.8～8.0之間，低於7.0則死亡，但解脲支原體最適pH 6.0～6.5。支原體的培養37℃即可，當然，初次培養37℃，5%～10%CO2效果更好。人型，肺炎，24～48小時即可達到對數生長期。
培養方法
分離培養是支原體實驗室診斷的惟一方法。大多數支原體兼性厭氧，有些菌株在初分離時加入5%CO2生長更好。生長緩慢，在瓊脂含量較少的固體培養基上孵育2～3天出現典型的“荷包蛋樣”菌落（圓形，直徑10～16μm），核心部分較厚，向下長入培養基，周邊為一層薄的透明顆粒區。解脲支原體在含尿素和以硫酸錳為產氨指標的完全診斷培養基上生長良好，形成具有特徵性的深棕色菌落。此外，支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養細胞中生長。
正常參考值
培養無支原體感染。
臨床意義
陽性見於支原體感染。肺炎支原體主要引起上呼吸道感染、氣管炎、支氣管炎、肺炎等，嚴重時可引起肺外併發症，如脊髓炎、腦膜炎等。解脲支原體可引起非淋菌性尿道炎、前列腺炎、女性陰道炎和宮頸炎等。
