介紹
圖示鼠肝細胞的過氧化物酶體的電子顯微鏡照片,每一個微體中有一個晶核,動物細胞微體中的晶核幾乎都是尿酸氧化酶。過氧化物酶體的發現及所含酶類過氧化物酶體的發現
過氧化物酶體、溶酶體都是deDuve和他的同事發現的,發現的過程很簡單,但是實驗的設計卻給我們以極大的啟發。
離心分離實驗
deDuve和他的同事通過梯度離心分離到溶酶體之後發現至少有一種酶與溶酶體酶的性質不同:尿酸氧化酶不是酸性水解酶,但離心時總是與酸性水解酶在一起,只是沉降行為稍有不同。
通過蔗糖密度梯度離心,發現尿酸氧化酶存在的密度區是1.25g/cm3,而線粒體和溶酶體分別是1.19g/cm3和1.20g/cm3~1.24g/cm3,由於密度差異太小,而溶酶體自身的密度範圍又很寬,如何將尿酸氧化酶與溶酶體的酶分開?
他們根據一次偶然的實驗觀察,設計了一個很好的方法:用一種去垢劑TritonWR1339注射小鼠,這種去垢劑在細胞內主要積累在溶酶體中,並使溶酶體的浮力密度降低到1.1-1.14g/cm3,這樣就可以將尿酸氧化酶與溶酶體和線粒體分開。