基因合成法

基因合成法是在體外人為地利用酶學方法或化學方法合成目的基因。可分為兩類。①酶學法合成：以RNA為模板，通過逆轉錄合成cDNA。這是獲得真核結構基因的最主要、最常用的方法。由於分離RNA單一組分很困難，所以合成的cDNA分子往往是混雜的，需要用基因分離法分離;這種方法不易得到全長的互補DNA分子，所以還要進一步剪下、拼接。②化學合成法：用化學法或化學法結合酶學法來合成目的基因。自1979年以來，國外已有近百種化學合成基因，包括胰島素基因，干擾素基因，以及乳糖操縱基因，啟動子調節序列等。使用這一方法首先要已知所要合成的基因的序列。

在化學法中採用過磷酸二酯法，磷酸三酯法，亞磷酸三酯法，以及在後兩種方法的基礎上建立起來的固相合成和自動化方法，固相合成法是目前最常用的方法。現在已有核酸合成儀。用這種儀器合成的DNA鏈一般能達到20個核苷酸左右，通過拼接可得到較長的片段。人工合成基因的優越之處在於合成的隨意性。可根據需要來合成基因，並可以任意增加、減少或變更基因中的一個或幾個核苷酸。