人芳香二烷基磷酸酯酶基因叢基因多態性快速分析法
目的建立一種人芳香二烷基磷酸酯酶(PON)基因叢等位基因快速分型法.方法在Multiplex-PCR-RELP基礎上,通過引物設計錯配,在一體系中同時擴增分別含PON1-192、PON1-55和PON2-311位密碼子的DNA片段,當等位基因為PON1-192R/PON1-55L/PON2-311S時,PCR擴增產物中均被引入唯一的限制性內切酶HinfⅠ的識別位點G*ANTC.PCR擴增產物經酶消化,聚丙烯醯胺凝膠電泳後,相互分開的不同組合的片段,確認為不同的基因型組合,同時對3個位點進行基因分型.結果在檢測的80例健康個體中,等位基因頻率為PON1-192:Q46.9%,R53.1%;PON1-55:L95.6%,M4.4%;PON2-311:S78.8%,C21.2%.結論此方法快速分析3個位點的基因多態性,省時省力、節約經費,便於3個位點之間的連鎖分析,具有推廣價值.
微囊藻偽空胞基因叢的研究
微囊藻(Microcystissp.)是廣泛分布於世界各地的單細胞藍藻,多生長於湖泊和池塘中,在夏季易大量生長而形成水華,造成水環境惡化。在微囊藻細胞中,有一種特殊的由中空圓柱狀氣囊組成的結構——偽空胞能夠為細胞提供浮力,使它們在水體中垂直遷移,獲得適宜的生長條件,因而,對於微囊藻水華的暴發起到重要的作用。本研究比較了多個微囊藻株的偽空胞基因叢結構特點,探討了它們的系統演化關係和表達差異,並對一種微囊藻中偽空胞基因叢的轉錄調控進行了初步研究。主要研究內容和研究結果分為四個部分:第一,微囊藻FACHB854偽空胞基因叢的獲得。首先構建FACHB854的基因組文庫,篩選得到了含有gvpA-gvpC基因的克隆;利用PCR、反向PCR和測序,最終獲得包含10個不同的基因、約7.5kb的基因叢全長序列,其中gvpA有兩個拷貝;用Southernblot雜交的方法證明,在FACHB854的基因組中僅存在這一個偽空胞基因叢。第二,微囊藻偽空胞基因叢的結構類型、演化關係和表達差異。對多種微囊藻的gvpA-gvpC區域進行了克隆測序,總結出偽空胞基因叢的四種結構類型:2gvpA+gvpC(3...
【英文摘要】Microcystisisagroupofunicellularcyanobacteriadistributedallovertheworldandmostfrequentlyoccurinfreshwaterlakesandponds.Insummer,massiveproductionofMicrocystisresultsintheoutbreakofwaterblooms,causingdeteriorationofwaterenvironments.InMicrocystiscells,aspecialhollowcylindricalstructure,gasvesicle,facilitatesbuoyancyandenablescellstoperformverticalmigrationinwatercolumnandgainfavorablegrowthconditions,consequently,playsanimportantroleinthe...
