基因內重組

基因內重組是指在同一順反子內的突變位點之間的重組。這種重組的特徵是負干涉和非互補性的,即在同一四分體中出現野生型或雙重突變型,但二者並不同時出現。

基因內重組 intragenicrecombination

在同一順反子內的突變位點之間的重組。這種重組的特徵是負干涉和非互補性的,即在同一四分體中出現野生型或雙重突變型,但二者並不同時出現。

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套用高效細菌內同源重組系統pAd-Easy,製備含人血管內皮細胞生長因子121(VEGF121)基因的重組腺病毒,感染兔骨髓基質幹細胞(BMSCs),並檢測外源基因的表達,為其進一步套用於血管化組織工程骨組織的構建打下基礎。方法自pCDNA-VEGF121質粒中切取VEGF121基因,將VEGF基因克隆穿梭質粒,在BJ5183細菌內重組,在293細胞中構建攜帶VEGF基因的重組腺病毒,將腺病毒感染BMSCs,利用ELISA、免疫組織化學的方法檢測VEGF121在BMSCs中的表達。結果通過pAd-Easy系統成功構建高滴度的攜帶VEGF121基因重組腺病毒pAd—VEGF,ELISA檢測顯示經轉染的BMSCs中VEGF121的表達均明顯增強,隨著感染病毒MOI值的增高,VEGF121的表達量相應增高,差異有統計學意義(P〈0.01),免疫組化法顯示經基因轉染的BMSCs中有強陽性信號,未轉染組出現陰性結果。結論Ad—VEGF轉染BMSCs後能穩定提高VEGF蛋白的表達。

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