簡介
圓葉無心菜種中文名：圓葉無心菜
種拉丁名：ArenariaorbiculataRoyleexEdgew.etHook.f.
科中文名：石竹科
科拉丁名：Caryophyllaceae
屬中文名：無心菜屬
屬拉丁名：Arenaria
國內分布：雲南、西藏東南部、四川
國外分布：印度、尼泊爾、不丹
海拔：2300-4500
中國植物志：26:171
英文植物志：6:45
圓葉無心菜的組織培養方法
本發明是重金屬超累積植物圓葉無心菜的組織培養方法。該方法以圓葉無心菜的頂芽、嫩莖或葉片為外植體，通過不同組合的試驗設計，篩選出了培養條件、愈傷組織誘導、分化芽誘導、分化芽生根、煉苗和移栽的最佳方法。通過反覆實驗得出：誘導愈傷組織的最佳培養基是Ｍｓ＋６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ；誘導分化芽的最佳培養基是Ｍｓ＋６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ；誘導分化芽生根的最佳培養基是Ｍｓ＋６－ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ。培養溫度（２５±２）℃，光照強度１６００－２４００ｌｕｘ，光照時間１２／ｄ，培養時間３０天。在分化苗出瓶前打開瓶蓋，２天后用清水洗掉根上的培養基，再用１‰ＫＭｎＯ４溶液浸泡３０ｓ，栽到高溫滅菌的珍珠岩和沙土混合的基質中，置於溫室中１５天后，再移栽到土壤中。該方法可以通過組織培養方式快速繁殖圓葉無心菜的幼苗。
一種圓葉無心菜的組織培養方法，其步驟是：
（１）圓葉無心菜外植體的選擇
以圓葉無心菜的頂芽、嫩莖和葉片為外植體；
（２）圓葉無心菜愈傷組織的誘導
將圓葉無心菜的頂芽、嫩莖和葉片在自來水下沖洗１０－２０ｍｉｎ後，在無菌條件下用７０％的酒精浸泡消毒３０ｓ，用１０％ＮａＯＣｌ消毒８－１０ｍｉｎ，再用無菌水反覆沖洗，切取０．４－０．６ｃｍ的小段，接種到經高壓滅菌培養基中進行愈傷組織的誘導；基本培養基選用ＭＳ培養基，附加細胞分裂素６－ＢＡ０．１～０．８ｍｇ／Ｌ，生長ＮＡＡ０．０１～０．１ｍｇ／Ｌ；培養基ｐＨ值為５．８，蔗糖３％，瓊脂為７ｇ／Ｌ；培養溫度（２５±２）℃，光照強度１６００－２４００ｌｕｘ，光照時間１２／ｄ，培養３０天；
（３）圓葉無心菜愈傷組織分化芽的誘導
將培養出的圓葉無心菜的愈傷組織在無菌條件下接種到經高壓滅菌的培養基中進行愈傷組織分化芽的誘導；基本培養基選用ＭＳ培養基，附加細胞分裂素６－ＢＡ０．５～２．０ｍｇ／Ｌ，生長素ＮＡＡ０．０５～０．５ｍｇ／Ｌ；培養基ｐＨ值為５．８，蔗糖３％，瓊脂為７ｇ／Ｌ；培養溫度（２５±２）℃，光照強度１６００－２４００ｌｕｘ，光照時間１２／ｄ，培養３０天；
（４）圓葉無心菜愈傷組織分化芽生根的誘導
將培養出的圓葉無心菜的愈傷組織分化芽在無菌條件下接種到經高壓滅菌的培養基中進行愈傷組織分化芽生根的誘導；基本培養基選用ＭＳ培養基，附加細胞分裂素６－ＢＡ０．０５～０．５ｍｇ／Ｌ，生長素ＮＡＡ０．２～２．０ｍｇ／Ｌ；培養基ｐＨ值為５．８，蔗糖３％，瓊脂為７ｇ／Ｌ；培養溫度（２５±２）℃，光照強度１６００－２４００ｌｕｘ，光照時間１２／ｄ，培養３０天；
（５）煉苗及移栽
在分化苗出瓶前２天保持瓶蓋半遮瓶口，２天后將小苗從瓶口取出，用清水洗淨根部的培養基，再用１‰ＫＭｎＯ４溶液浸泡３０ｓ，濾乾後栽到高溫滅菌的珍珠岩和沙土混合的基質中，置於溫室中１５天后，再移栽到土壤中。雲南農業大學
