噬菌體分離分析法

噬菌體分離分析法是為測定噬菌體而採用的分離和分析技術與方法。噬菌體是寄生於細菌的病毒,廣泛分布於自然界,侵入宿主細胞後大量增殖而導致其裂解,使培養液變清。據此,可分析和檢驗噬菌體的存在。

常用方法有:①不加菌培養分析法,即將被檢樣品與肉湯一起混合培養,再將培養液2500rpm/min離心15分鐘,取上清液經濾菌器過濾,再將濾液培養,觀察有無細菌生長來判斷噬菌體的存在。②加菌培養分析法,將樣品經過上述處理,獲得無菌濾液後加人相應的細菌純培養物數滴,確證無菌生長即可判斷有噬菌體存在。③加熱分析法,當樣品中噬菌體過少時,常在濾菌時噬菌體被吸附一部分,而影響分離結果,常採用此法來補救。在已確證噬菌體存在的前提下,在樣品中加入敏感菌株與液體培養基,進行培養而使其增殖、釋放,以製備裂解液,並將其過濾除菌。最後將無菌裂解液滴加到塗有敏感菌的平板上,在37℃培養過夜,在濾液滴加處形成無菌的透明噬菌斑,從此可得到分離的噬菌體。

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