原基因分類
牛凝乳酶原基因克隆及序列的進化分析
利用RT-PCR克隆獲得牛凝乳酶原基因的cDNA序列, 測序後與GenBank中凝乳酶原基因進行序列比對和生物信息學分析。序列比對統計分析顯示, 該基因為牛凝乳酶原B基因, 與已知牛和其他哺乳動物的凝乳酶原基因具有很高的同源性,18種哺乳動物凝乳酶原基因密碼子一、二、三位點的鹼基偏倚度分別為:6.227、1.042和 1.456。這表明該基因具有整體保守性和突變位點偏倚性兩個特徵, 可以作為哺乳動物系統進化的研究對象。採用多種方法構建的該基因系統進化樹一致表明, 偶蹄動物與靈長動物的親緣關係比偶蹄動物與齧齒動物的親緣關係更近, 比偶蹄動物與食肉動物的親緣關係更遠, 並且18種哺乳動物的親緣關係與動物種系進化關係一致, 為哺乳動物系統進化關係研究提供了分子水平的佐證和依據。
糖尿病大鼠胰島素原基因治療的研究
中文名稱: 糖尿病大鼠胰島素原基因治療的研究
論文編號: 3543857
英文名稱: Proinsulin Gene Therapy for Diabetic Rats
學位類型: 碩士畢業論文
專業: 內科學
關鍵字: 胰島素原基因 基因重組 基因治療 類胰島β細胞系
目的 (1)構建大鼠胰島素原(proinsulin)基因的真核細胞表達質粒,並將其分別導入糖尿病(DM)大鼠體內和非胰島β細胞內,探討胰島素原轉基因治療對糖尿病大鼠血糖的調節作用。(2)構建基因工程類胰島β細胞系。 方法 (1)從大鼠胰腺組織中提取總RNA,通過逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)法獲得大鼠胰島素原基因cDNA全長序列,並經EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ酶切後,套用基因重組和分子克隆的方法與真核細胞表達質粒pCMV-Script Vector構建重組表達質粒pCMV/proinsulin。(2)鏈脲佐菌素(STZ)誘導SD大鼠糖尿病模型,分別用門靜脈注射及肌肉注射的方法將重組表達質粒pCMV/proinsulin DNA裸質粒導入糖尿病大鼠模型以觀察其血糖的變化。門靜脈注射治療組(A組)大鼠接受pCMV/proinsulin DNA 100μg/鼠,對照組(B組)給予同等劑量pCMV空載質粒DNA;肌肉注射治療組(C組)大鼠接受pCMV/proinsulin DNA 100μg/鼠,對照組(D組)給予同等劑量pCMV空載質粒DNA。同時設立DM對照組(DM組)和正常對照組(...
膠原基因多態性決定骨質疏鬆的易感人群
在COL1A1 膠原基因上Sp1轉錄因子結合位點的多態性可增加該人群對骨質疏鬆症及有關骨折的易感性。
以前,英國阿柏丁大學的Stuart Ralston醫生及其同事的研究表明,一個特定的單核苷酸多態性(SNP)可導致COL1A1基因形成“s”形,從而影響與Sp1蛋白的結合。他們在對早期研究進行meta分析時發現,s等位基因純合子(ss)個體的骨密度非常低,而沒有SNP(SS)個體的骨密度則比較高。雜合子(Ss)個體的骨密度則為中等。
該研究的作者還報告了相似的結果,即與SS 個體相比,ss 個體發生骨折的幾率高86%,Ss 個體發生骨折的幾率高52%。且僅就脊椎骨骨折而論,其發生的危險性增高更為明顯。
通過對來自不同等位基因人群的成骨細胞進行體外培養,研究人員證實,COL1A1 s等位基因與Sp1蛋白的親合力要大於S等位基因,這導致產生大量的基因產物。這樣也就增加了I 型膠原α1鏈與α2鏈的比值。
與SS個體的骨質相比,具有任何形式s等位基因的人,其骨質相對比較脆弱,而且其骨中含有較多的有機成分,這說明Ss或ss個體骨質中礦物質含量相對缺乏。
Ralston稱,骨質的質量與骨質的數量在決定骨折方面同等重要。該研究顯示的就是一種由遺傳變數決定骨質質量的情況。在高加索人群中,SS、Ss、ss 的比例分別為70%/25%/5%。
研究者認為,從臨床的觀點來看,當‘s’基因型與低骨密度同時出現時,骨折危險會非常高。這種病人應是優先接受治療的對象。