檢查前準備
1.檢查前至少6小時禁食、禁水，戒菸，檢查當日早晨空腹。
2.幽門梗阻患者檢查前應清潔胃腔（胃腸減壓或者洗胃）。
3.檢查前應了解患者病史及相關檢查結果，並做好檢查前解釋，消除顧慮。
4.有出血傾向者，應檢查凝血功能。
操作方法
1.操作前檢查
操作前需檢查內鏡光源是否正常，檢查大角鈕、小角鈕、注水注氣按鈕、抬鉗鈕、負壓吸引按鈕是否正常。
2.插鏡
向患者說明如何配合，取得患者合作。患者取左側臥位，頭略抬，術者左手握十二指腸鏡頭部，適當轉動大旋扭，使其鏡端的彎度與咽喉的生理彎曲近似，右手輕輕送入鏡端，順其吞咽動作滑入食管，不可強行插入以免引起梨狀窩血腫或其他損傷。
3.觀察食管
十二指腸鏡為側視鏡，內鏡進入食管後，只能看到一側管壁，故觀察食管不甚理想。此時要特別注意無阻力可逐漸前進；如遇阻力則應考慮到食管狹窄、腫瘤或憩室等情況，不能盲目進鏡。內鏡下見到食管下段的柵欄狀黏膜下血管及齒狀線，提示到達賁門，此時可將內鏡逆時針或向左側旋鏡，充氣的同時進入胃腔。
4.觀察胃腔
十二指腸鏡在進入胃腔後，順時針旋轉鏡身，將鏡端送直至幽門口處。側視鏡要比直視鏡通過幽門口困難，且方法不同。調整幽門口至內鏡視野正下方中央。
5.觀察球部
球部是內鏡操作中穿孔的好發部位，進鏡時動作要穩、準、輕、柔，切勿使用蠻力。進入十二指腸球部後，右旋鏡身並推鏡，進入十二指腸降部。
6.尋找乳頭
在十二指腸降部先找到十二指腸口側的隆起，乳頭通常位於其肛側端。有時在十二指腸降部上段發現小息肉樣隆起，為副乳頭，其肛側2～3 cm常可找到乳頭。此外，乳頭表面常呈淡紅色橢圓形隆起，有的似輕度糜爛外觀，若見有膽汁溢出，即可確認。
7.插管
看見十二指腸乳頭後，將小角鈕向右旋轉、大角鈕向上旋轉，向外拉直鏡身，調整乳頭至視野最佳位置後，鎖定大、小角鈕。通過工作通道插入造影導管，使用大、小角鈕以及抬鉗器配合，進行選擇性膽、胰管插管或其他治療。
臨床意義
十二指腸鏡採用側視鏡的方式，可清楚觀察十二指腸乳頭結構及表面黏膜情況，使用抬鉗器可順利完成乳頭病變的活檢、胰膽管插管造影診斷及其他治療。採用側視鏡，使其在操作上與普通前視型內鏡相比有較大的差別，同時側視鏡視野小，只能觀察到部分食管及胃壁結構，容易遺漏部分病變，一般不作為上消化道病變的常規檢查手段。
