分批式培養

分批式培養

分批式培養是指先將細胞和培養液一次性裝入反應器內進行培養,細胞不斷生長,同時產物也不斷形成,經過一段時間的培養後,終止培養。在細胞分批培養過程中,不向培養系統補加營養物質,而只向培養基中通入氧,能夠控制的參數只有pH值、溫度和通氣量。由於分批式培養過程的環境隨時間變化很大,而且在培養的後期往往會出現營養成分缺乏或抑制性代謝物的積累使細胞難以生存,不能使細胞自始至終處於最優的條件下生長、代謝,因此在動物細胞培養過程中採用此法的效果不佳。

分批式培養是指先將細胞和培養液一次性裝入反應器內進行培養,細胞不斷生長,同時產物也不斷形成,經過一段時間的培養後,終止培養。在細胞分批培養過程中,不向培養系統補加營養物質,而只向培養基中通入氧,能夠控制的參數只有pH值、溫度和通氣量。因此細胞所處的生長環境隨著營養物質的消耗和產物、副產物的積累時刻都在發生變化,不能使細胞自始至終處於最優的條件下,因而分批培養並不是一種理想的培養方式。分批培養過程特徵如圖。
動物細胞分批式培養過程的特徵動物細胞分批式培養過程的特徵

細胞分批式培養的生長曲線與微生物細胞的生長曲線基本相同。在分批式培養過程中,可分為延滯期、對數生長期、減速期、平穩期和衰退期等五個階段。
分批培養過程中的延滯期是指細胞接種後到細胞分裂繁殖所需的時間,延滯期的長短根據環境條件的不同而不同,並受原代細胞本身的條件影響。一般認為,細胞延滯期是細胞分裂繁殖前的準備時期,一方面,在此時期內細胞不斷適應新的環境條件,另一方面又不斷積累細胞分裂繁殖所必需的一些活性物質,並使之達到一定的濃度。因此,一般選用生長比較旺盛的處於對數生長期的細胞作為種子細胞,以縮短延滯期。
細胞經過延滯期後便開始迅速繁殖,進入對數生長期,在此時期細胞隨時間呈指數函式形式增長,細胞的比生長速率為一定值,根據定義
式中t:培養時間(h);
X0:細胞的初始濃度;
X:t時刻的細胞濃度;
μ:細胞的比生長速率。
細胞通過對數生長期迅速生長繁殖後,由於營養物質的不斷消耗、抑制物等的積累、細胞生長空間的減少等原因導致生長環境條件不斷變化,細胞經過減速期後逐漸進入平穩期,此時,細胞的生長、代謝速度減慢,細胞數量基本維持不變。
在經過平穩期之後,由於生長環境的惡化,有時也有可能由於細胞遺傳特性的改變,細胞逐漸進入衰退期而不斷死亡,或由於細胞內某些酶的作用而使細胞發生自溶現象。
典型的分批培養隨時間的變化曲線典型的分批培養隨時間的變化曲線

在分批培養過程中,與細胞的生長、代謝相關的主要參數有限制性營養物質濃度及其比消耗速率、細胞密度及其比生長速率、產物濃度及其生成速率、抑制物的濃度等。根據比速率的定義,分批式培養過程有下述方程:
式中μ:細胞的比生長速率:
S:底物濃度
QS:基質比消耗速率;
P:產物濃度;
QP:產物比生產速率。
典型的分批培養隨時間變化的過程曲線如圖14-3所示。
由於分批式培養過程的環境隨時間變化很大,而且在培養的後期往往會出現營養成分缺乏或抑制性代謝物的積累使細胞難以生存,不能使細胞自始至終處於最優的條件下生長、代謝,因此在動物細胞培養過程中採用此法的效果不佳。

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