基本信息
出版社: 化學工業出版社; 第1版 (2006年3月17日)
平裝: 178頁
開本: 16開
ISBN: 7502580921, 9787502580926
條形碼: 9787502580926
商品尺寸: 24 x 17 x 0.8 cm
商品重量: 259 g
ASIN: B00114DLSW
內容簡介
本書是一本以實驗開發為基礎的指導性書籍，以一種大腸桿菌熱不穩定的內毒素亞基(LTB)為典型材料，系統具體地介紹了其研究中所採用的分子生物學方法和蛋白質化學方法，包括基因重組、克隆、篩選、表達及蛋白質的分離純化及鑑定等。本書主要以實驗操作步驟的形式，系統全面地介紹常用的研究方法和手段，但在每個實驗前都有簡練的理論說明，使理論和實踐相結合。通過本書的學習，可以使讀者將當前的分子生物學和生物化學實驗技術作為一個整體進行掌握。 本書適合於生物學、生物化學、微生物學和生物醫藥專業本科生、研究生的實驗參考書，同時對於正在學習化學、化工、動物學、植物學的讀者希望提高實驗技能也很有幫助。
作者簡介作者：(美)布倫達D.斯潘格勒 譯者：茹炳根 韓鐵鋼 茹強
目錄引言和背景
第一部分 分子生物學
實驗一
微量移液器使用指南
實驗二
質粒DNA模板的製備
實驗三
(1)測定質粒DNA濃度
(2)PCR擴增質粒DNA的LTB基因
實驗四
(1)瓊脂糖凝膠電泳
(2)PCR產物回收
實驗五
(1)限制性內切酶酶切LTB插入基因和載體
(2)平板製備
實驗六
(1)瓊脂糖凝膠電泳法純化酶切後的插入基因片段和載體
(2)酶切後插入基因片段和載體的回收
實驗七
(1)DNA濃度測定
(2)插入基因與載體的連線
實驗八
重組體轉化宿主細胞
實驗九
(1)挑取菌落，PCR檢測插入片段
(2)用可能的重組子劃線平板
(3)接種培養物/PCR反應/分離質粒
實驗十
(1)瓊脂糖凝膠電泳檢測插入基因
(2)用質粒少量製備試劑盒純化pET28LTB
實驗十一
(1)DNA濃度檢測
(2)乙醇沉澱質粒DNA
(3)測序反應
實驗十二
(1)純化延伸反應產物
(2)測序凝膠示範
實驗十三一
(1)分析序列數據
(2)驗證插入序列
實驗十四
(1)基因表達一
(2)表達宿主的轉化
實驗十五
誘導LTB基因表達：測定最大表達的時間
第二部分蛋白質化學
實驗十六
(1)SDS聚丙烯醯胺凝膠電泳分析誘導時間過程
(2)用Western Blot將蛋白質轉移至膜上
實驗十七
western Blot的顯像
實驗十八
大規模培養物的製備
實驗十九
親和層析法分離LTB
實驗二十
(1)柱層析分段物的SDS_PAGE鑑定
(2)免疫印跡檢驗LTB的存在
實驗二十一
蛋白質濃縮和結晶
實驗二十二
準備ELISA微量滴定板來分析系列神經苷脂配體
實驗二十三
用ELISA分析系列神經節苷脂配體
實驗二十四
蛋白質結構測定：X射線衍射技術
實驗二十五
用X射線衍射分析蛋白質晶體的特徵(可任選)
實驗二十六
引物設計
索引
