內容簡介
本書的編寫指導思想是打破傳統實驗教學模式,不受學生專業與層次的限制,以能力培養為主線,推進學生自主學習、研究性學習。對實驗教學內容進行分類、整合,形成了基礎實驗操作技術、經典驗證性實驗、綜合性實驗、臨床免疫實驗、創新性實驗五篇,共27章,85個實驗。完全能夠滿足各層次、各專業免疫學教學的需求。在基礎實驗操作技術中介紹了現代免疫學常用方法技術,例如細胞培養、基因克隆、動物模型的建立等,為創新性實驗提供了鋪墊。在創新性實驗中,提出了有一定覆蓋面和代表性的設計選題範例或方向,寫作手法以啟迪思維為主,但不失指導性與示範性,體現了我們注重學生能力培養所做的探索。臨床免疫實驗中介紹了目前臨床常用的免疫學檢驗方法在疾病診斷、防治中的套用,例如微粒子酶免疫分析技術、電化學發光免疫測定、螢光偏振免疫測定法等。
本教材由教學經驗和實驗室經驗豐富的教師編寫,力求原理講解清楚,方法介紹明白,不少內容是作者的經驗之談。全書約32萬字,插圖57幅。適用於五年制、七年制各專業基礎免疫學和臨床免疫學實驗教學,也可供相關專業的教師、研究生以及從事臨床檢驗、衛生防疫、免疫學研究的實驗技術人員使用。
目錄
第一篇基本實驗操作技術
第1章血液標本的採集
實驗一人血液標本的採集
第2章細胞計數及活性測定
實驗三細胞計數的方法
實驗四細胞活力測定
第3章細胞培養
實驗五細胞培養用器材的準備與無菌操作
實驗六原代細胞培養
實驗七細胞傳代培養
實驗八細胞的凍存與復甦
第4章動物模型的建立
實驗九免疫功能低下動物模型
實驗十移植性腫瘤動物模型
第5章 實驗動物給藥方法
實驗十一 實驗動物的捉持與固定
實驗十二 實驗動物的給藥方法
第6章目的基因的克隆與表達
實驗十三RT-PCR擴增小鼠IL-2基因
實驗十四小鼠IL-2原核表達質粒的構建
實驗十五重組mIL-2的誘導表達及SDS-PAGE鑑定
實驗十六重組mIL-2的親合層析純化及濃度測定
第二篇經典驗證性實驗
第7章凝集反應
實驗十七玻片凝集試驗
實驗十八試管凝集試驗
實驗十九間接凝集試驗
實驗二十協同凝集試驗
第8章沉澱反應
實驗二十一單向瓊脂擴散
實驗二十二雙向瓊脂擴散
實驗二十三對流免疫電泳
實驗二十四免疫電泳
實驗二十五火箭免疫電泳
實驗二十六交叉免疫電泳
實驗二十七免疫比濁
第9章補體參與的免疫反應
實驗二十八溶血試驗
實驗二十九血清總補體活性測定
實驗三十補體依賴的細胞毒試驗
第lO章免疫標記技術
實驗三十一酶聯免疫吸附試驗
實驗三十二酶聯免疫斑點(EILISPOT)技術檢測淋巴細胞分泌活性
實驗三十三間接免疫螢光法檢測人外周血T細胞亞群
實驗三十四膠體金的製備
實驗三十五免疫金的製備
實驗三十六膠體金斑點層析技術檢測早期妊娠
實驗三十七中性粒細胞吞噬功能的化學發光測定
第11章免疫細胞的分離純化
實驗三十八沉降法分離外周血白細胞
實驗三十九密度梯度離心法分離外周血單個核細胞
實驗四十小鼠脾細胞的製備
實驗四十一小鼠胸腺細胞的製備
實驗四十二小鼠骨髓樹突狀細胞的製備
實驗四十三小鼠腹腔巨噬細胞的製備
第12章吞噬細胞功能測定
實驗四十四硝基四氮唑藍還原試驗
實驗四十五細菌計數法測定中性粒細胞吞噬功能
實驗四十六巨噬細胞吞噬功能測定
實驗四十七中性粒細胞趨化功能測定
第13章超敏反應
實驗四十八豚鼠過敏反應
實驗四十九皮膚速髮型超敏反應
實驗五十血清總IgE測定
實驗五十一特異性IgE的測定
第三篇綜合性實驗
第14章多克隆抗體的製備
實驗五十二免疫血清的製備
實驗五十三免疫血清的鑑定與純化
第15章單克隆抗體的製備
實驗五十四動物的選擇與免疫
實驗五十五細胞融合
實驗五十六雜交瘤的篩選與克隆
實驗五十七單克隆抗體的製備與鑑定
實驗五十八單克隆抗體Fab片段的製備
第16章免疫印跡
實驗五十九免疫印跡技術
第17章免疫細胞檢測
實驗六十溶血空斑試驗
實驗六十一APAAP橋聯酶標法檢測T細胞亞群
實驗六十二流式細胞術檢測T細胞亞群
第18章免疫細胞功能檢測
實驗六十三淋巴細胞增殖試驗
實驗六十四混合淋巴細胞反應
買驗六十五NK細胞活性測定
實驗六十六細胞毒性T淋巴細胞活性測定
第19章細胞因子的檢測
實驗六十七白細胞介素-2活性的檢測
實驗六十八腫瘤壞死因子的生物學活性檢測
第20章細胞凋亡的檢測
實驗六十九凝膠電泳法檢測小鼠胸腺細胞凋亡
實驗七十末端脫氧核糖核苷酸轉移酶介導的缺口末端標記法檢測細胞凋亡
實驗七十一流式細胞術檢測細胞凋亡
第四篇臨床免疫實驗
第21章感染性疾病的免疫學檢測
實驗七十二IgM捕獲法檢測TORCH感染特異性IgM抗體
實驗七十三雙抗原夾心ELISA法檢測人類免疫缺陷病毒抗體
實驗七十四ELISA法檢測B型肝炎病毒抗原及特異性抗體
買驗七十五IgM捕獲法檢測A型肝炎病毒特異性IgM抗體
第22章腫瘤標誌物的檢測
買驗七十六微粒子化學發光免疫法檢測甲胎蛋白
實驗七十七微粒子化學發光免疫法檢測癌胚抗原
買驗七十八微粒子化學發光免疫法檢測其他腫瘤相關抗原
第23章自身免疫性疾病的檢測
買驗七十九斑點酶免疫法檢測抗ENA抗體
買驗八十ELISA檢測抗甲狀腺球蛋白抗體
第24章內分泌疾病的免疫學檢測
實驗八十一電化學發光免疫法檢測甲狀腺激素
實驗八十二電化學發光免疫法檢測雌二醇
第25章血液藥物濃度的檢測
實驗八十三螢光偏振免疫法測定血液環孢素濃度
實驗八十四螢光偏振免疫法測定血液卡馬西平濃度
實驗八十五微粒子酶免分析法測定血液地高辛濃度
第五篇創新性實驗
第26章實驗的選題、設計、實施與總結
第27章創新性實驗參考選題
附錄1常用實驗儀器設備簡介
附錄2常用試劑配製