正常參考值
0~6u(濁度試驗)
-或+(絮狀試驗)
臨床意義
急性肝炎的診斷 急性肝炎(病毒性、中毒性)TTT陽性率達60%~80%,發病1周開始升高,2周達高峰,以後逐漸恢復。
肝炎與肝硬化病情診斷 慢性肝炎、肝硬化伴進行性肝損害,TTT明顯升高。
阻塞性黃疸與肝炎的鑑別 無肝細胞損害,TTT正常,急性肝實質損害,TTT升高。
其他疾病 瘧疾、血吸蟲、系統性紅斑狼瘡及各種亞急性、慢性細菌感染等。
實驗基本步驟
(一)原理
當血清與麝香草酚巴比妥緩衝液作用時,其中麝香草酚可減低血清內類脂質的分散力,而血清經巴比妥緩衝液稀釋後,球蛋白部分溶解度減低而發生沉澱,此沉澱為球蛋白、類脂質和麝香草酚的複合體,使溶液變濁,與標準管比較,即得濁度的單位數。
(二)試劑
1.麝香草酚巴比妥緩衝液(pH7.8)。稱取巴比妥鈉1.03g,巴比妥1.38g,加蒸餾水500m1,加熱至沸,放冷後,加入10%麝香草酚酒精溶液5m1,用力搖勻,塞好瓶口,置室溫下過夜,過濾後備用。
國內有配製此液的片劑供應,臨用時稀釋即成,適用於基層單位。
2.硫酸鋇人工標準管的製備。稱取結晶氮化鋇1.175g,或無水氯化鋇1.0g,溶於蒸餾水內,使成100m1,即成0.048mol/L氯化鋇溶液。另於100m1容量瓶內加入0.1mol/L硫酸液約70m1,滴加上述氯化鋇液3ml,邊加邊搖,再以0.1mol/l硫酸液稀釋至刻度處,混勻後,即成乳白色硫酸鋇標準混懸液。此液相當於22.2麥氏單位(Maclagan Unit)。
取口徑,厚度,顏色相同的小試管20支,按下表配製標準管,加液後混勻,然後加塞浸蠟密封。如日久變質,應重新配製。
(三)方法
1.濁度試驗。取與標準管口徑一致的試管1支,加血清0.1ml,再加麝香草酚巴比妥緩衝液6m1,混合,放置30min,以帶黑字白紙為背景,與標準管目測比濁,求得濁度單位數。
如用光電比濁時,將測定液置於比色杯中,用520nm或綠色濾光板,以蒸餾水調零點,讀取光密度數,查標準曲線,即得濁度單位數。
標準曲線繪製:按上表配製不同濃度的標準液,用520nm或綠色濾光板比濁,以蒸餾水調零點,讀取各管光密度數。以光密度為縱坐標,以單位數為橫坐標,繪成標準曲線。
2.絮狀試驗。血清經麝香草酚濁度試驗後,繼續將試管放置室溫下24h,觀察其底部有無絮狀沉澱,可按下列標準判斷結果:
“—”液體呈均勻的乳白色,無顆粒出現,
“+”液體呈細顆粒狀,管底有極少量沉澱,
“++”液體呈較粗的絮狀物,管底有沉澱,
“+++”管底有較多的絮狀沉澱,但上層液體仍有輕度渾濁,
“++++”上層液體幾乎完全澄清,管底有大量絮狀物。
健康家畜血清絮狀試驗為“—”或“+”,作為陰性反應。 “++”以上判為陽性反應。
(四)注意事項 血清必須新鮮,最好空腹採血,因血脂增高時可使濁度增加。
麝香草酚巴比妥緩衝液的pH值對試驗的敏感度影響很大,一般要求pH7.8。