原理
細菌在代謝過程中發酵葡萄糖生成丙酮酸,2分子丙酮酸脫羧生成乙醯乳酸,繼續脫羧形成乙醯甲基甲醇,乙醯甲基甲醇在鹼性溶液中,被空氣中的氧氧化為二乙醯,二乙醯可與培養基中的精氨酸所含的弧基結合,形成紅色的化合物,即V-P實驗陽性。
培養基
葡萄糖蛋白腖水培養基
方法
1. O’Meara’s法
試劑:40g氫氧化鉀溶於100ml蒸餾水中,加入0.3g肌酐即成。
用瓊脂培養物將被檢細菌接種於葡萄糖蛋白腖水培養後,於35~37℃(哈夫尼亞菌則應在22~25℃)培養48-96小時,。於每毫升培養物中加入0.1ml,猛烈搖振混合。
2. Baritt’s法
試劑:6%α-奈酚酒精溶液為甲液,40%氫氧化鉀為乙液。
同上法接種培養細菌,於2ml培養液內加入甲液1ml和乙液0.4毫升,搖振混合。
試驗時強陽性者約於5分鐘後,可產生粉紅色反應,如無反應,應放在36±1℃下培養4h再進行觀察。(長時間無反應,可置室溫過夜),次日不變者為陰性。