簡介
MS是人名Murashige and Skoog的縮寫。
MS培養基是目前使用最普遍的培養基。其具有較高的無機鹽濃度,能夠保證組織生長所需的礦質營養還能加速愈傷組織的生長。由於配方中的離子濃度高,在配製、貯存和消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會影響離子間的平衡。MS固體培養基可用於誘導愈傷組織,也可用於胚、莖段、莖尖及花葯的培養,其液體培養基用於細胞懸浮培養時能獲得明顯的成功。MS培養基的無機養分的數量和比例比較合適,足以滿足植物細胞在營養上和生理上的需要。因此,一般情況下,不用再添加胺基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分。和其它培養基的基本成分相比,MS培養基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高,這是它的顯著特點。
配方單
mg/L工作液濃度 單位
大量元素:
NHNO 1650
KNO 1900
CaCl·2HO 440
MgSO·7HO 370
KHPO 170
微量元素:
KI 0.83
HBO 6.2
MnSO·4HO 22.3
ZnSO·7HO 8.6
NaMoO·2H2O 0.25
CuSO·5HO 0.025
CoCl·6HO 0.025
鐵鹽:
FeSO·7HO(27.8)
Na2-EDTA·2H2O(37.3)
有機物質:肌醇100
煙酸0.5
鹽酸吡哆醇(維生素B6) 0.5
鹽酸硫胺素(維生素B1) 0.1
甘氨酸2.0
注意:肌醇一般是要另外分開來獨自配成濃縮液,因為它比較難溶,一般配成100倍, 微量元素可以配成1000倍的。
配方表
大量元素 成分 | 分子量 | 使用濃度 (mg/L) |
硝酸鉀 KNO | 101.21 | 1900 |
硝酸銨 NHNO | 80.04 | 1650 |
磷酸二氫鉀 KHPO | 136.09 | 170 |
硫酸鎂 MgSO·7HO | 246.47 | 370 |
氯化鈣 CaCl·2HO | 147.02 | 440 |
微量元素 | ||
碘化鉀 KI | 166.01 | 0.83 |
硼酸 HBO | 61.83 | 6.2 |
硫酸錳 MnSO·4HO | 223.01 | 22.3 |
硫酸鋅 ZnSO·7 HO | 287.54 | 8.6 |
鉬酸鈉 NaMoO·2HO | 241.95 | 0.25 |
硫酸銅 CuSO·5 HO | 249.68 | 0.025 |
氯化鈷 CoCl·6HO | 237.93 | 0.025 |
鐵鹽 | ||
乙二胺四乙酸二鈉 Na2.EDTA | 372.25 | 37.25 |
硫酸亞鐵 FeSO·7HO | 278.03 | 27.85 |
有機成分 | ||
肌醇 | 100 | |
甘氨酸 | 2 | |
鹽酸硫胺素 VB1 | 0.1 | |
鹽酸吡哆醇 VB6 | 0.5 | |
煙酸 VB5 或 VPP | 0.5 | |
蔗糖 sucrose | 342.31 | 30g /L |
瓊脂 agar | 7 g /L |
注意事項
1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配製方法是:每種母液中的幾種成分稱量完畢後,分別用少量的蒸餾水徹底溶解,然後再將它們混溶,最後定容到1 L。
2.母液Ⅲ的配製方法是:將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中,邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解,然後將兩種溶液混合,並將pH調至5.5,最後定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。
MS 培養基中還需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生長調節物質,並且分別配成母液(0 1 mg/mL)。其配製方法是:分別稱取這3種物質各10 mg,將2,4-D和NAA用少量(1 mL)無水乙醇預溶,將6BA用少量(1 mL)的物質的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解過程需要水浴加熱,最後分別定容至100 mL,即得質量濃度為0 1 mg/mL的母液。
4.組織培養是否能夠獲得成功,主要取決於對培養基的選擇。不同的培養基具有不同的特點,也就適合於不同的植物種類和接種材料。在開展組織培養項目時,首先要對各種培養基進行了解和分析,以便能從中選擇合適的使用。組培用的培養基一般包括基礎培養基和激素,但是植物激素的種類和數量,隨著不同培養階段和不同材料有變化,因此各培養基配方中均不列入植物激素。常用的基礎培養基除了有MS培養基,還有B5培養基,N6培養基。