簡介
IPTG商品名稱:Isopropylβ-D-1-Thiogalactopyranoside
英文簡稱:IPTG
產品別名:Isopropylβ-D-Thiogalactoside
通用CAS:367-93-1
產品純度:Sigma≥99%,Merck≥98%，INALCO≥99%
產品性狀:白色或白色粉末,溶於水後呈清亮無色液體
分子式:C9H18O5S
分子量:238.30
保存溫度:2-8°C冷藏保存,配製好後保存於-20°C，室溫可放置一個月
主要作用：異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用極強的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛套用
IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質。基於這個特性，當pUC系列的載體DNA（或其他帶有lacZ基因載體DNA）以lacZ缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時，如果在平板培養基中加入X–Gal和IPTG，由於β–半乳糖苷酶的α–互補性，可以根據是否呈現白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。此外，它還可以作為具有lac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。
誘導原理
首先
E.coli的乳糖操縱子（元）含Z、Y及A三個結構基因，分別編碼半乳糖苷酶、透酶和乙醯基轉移酶，此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調節 基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白，後者與O序列結合，使操縱子（元）受阻遏而處於關閉狀態。在啟動序列P上游還有一個分解（代謝）物基因激 活蛋白（CAP）結合位點。由P序列、O序列和CAP結合位點共同構成lac操縱子的調控區，三個酶的編碼基因即由同一調控區調節，實現基因產物的協調錶 達 。其次
在沒有乳糖存在時，lac操縱子（元）處於阻遏狀態。此時，I序列在PI啟動序列操縱下表達的Lac阻遏蛋白與O序列結合，阻礙 RNA聚合酶與P序列結 合，抑制轉錄起動。當有乳糖存在時，lac操縱子（元）即可被誘導。在這個操縱子（元）體系中，真正的誘導劑並非乳糖本身。乳糖進入細胞，經β-半乳糖苷酶催化，轉變為半乳糖。後者作為一種誘導劑分子結合阻遏蛋白，使蛋白構象變化，導致阻遏蛋白與O序列解離、發生轉錄。異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的作用與半乳糖相同，是一 種作用極強的誘導劑，不被細菌代謝而十分穩定，因此被實驗室廣泛套用。使用方法
首先把IPTG配製成23.83 mg/ml（100 mM）的水溶液，並進行過濾除菌後保存。然後在100 ml的瓊脂培養基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的 二甲基甲醯胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），製作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養基。當DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有lacZ、Amp基因載體），然後轉化至lacZ缺失細胞中後，塗布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養基，可根據長出菌體的藍白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。
作用
誘導外源基因的表達，普遍套用於原核表達系統，使其表達量增高，產物穩定，具有易鑑定，易純化的優點。
