教科書定義
某種生物的基因組轉錄的所有mRNA經反轉錄產生的各種cDNA片段分別與克隆載體重組，貯存在一種受體菌克隆子群體之中，這樣群體稱為cDNA文庫。
基本途徑
1.將某種生物的基因組的轉錄部分，通過mRNA反轉錄，產生大量相應的cDNA片段。
2.將這些不同的cDNA片段與載體結合形成各種相應DNA重組體。
3.將DNA重組體導入宿主細胞。注意：因為轉入過程是隨機的，因此宿主細胞要有一定的數量，以確保能夠獲得所有類型的DNA重組體。
4.經克隆後，這些cDNA片段就貯存在一個受體細胞的群落中，其中每個受體細胞都含有一種或幾種cDNA，而整個群落則含有這個生物全部的cDNA，這個群落就構成了這種生物的cDNA文庫。
用途
由於cDNA文庫包含了該生物所有的可表達基因片段，因此可隨時篩選出需要的目的基因片段。不必再通過PCR製備，可以節省時間和成本，提高效率。
cDNA文庫與基因組文庫的區別：
途徑不同：cDNA文庫是經mRNA反轉錄cDNA獲得的；基因組文庫是將完整的DNA經限制性內切酶切割得到的。
內容不同：cDNA文庫只含有部分基因組信息，即可編碼能轉錄的那部分基因片段；基因組文庫包含了基因組內所有的基因片段。
1.途徑不同：cDNA文庫是經mRNA反轉錄cDNA獲得的；基因組文庫是將完整的DNA經限制性內切酶切割得到的。
2.內容不同：cDNA文庫只含有部分基因組信息，即可編碼能轉錄的那部分基因片段；基因組文庫包含了基因組內所有的基因片段。
