BCA蛋白濃度檢測

BCA蛋白濃度檢測 ：鹼性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物，測定其在562nm處的吸收值，並與標準曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結果，但受螯合劑(EDTA，EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實驗中，若發現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。

概述

二價銅離子在鹼性的條件下，可以被蛋白質還原成一價銅離子，一價銅離子和獨特的BCA　SolutionA（含有BCA）相互作用產生敏感的顏色反應。兩分子的BCA螯合一個銅離子，形成紫色的反應複合物。該水溶性的複合物在562nm處顯示強烈的吸光性，吸光度和蛋白濃度在廣泛範圍內有良好的線性關係，因此根據吸光值可以推算出蛋白濃度。

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