雷射顯微鏡

雷射顯微鏡

雷射顯微鏡(CLSM)由共聚焦顯微鏡和飛秒紅外雷射器Verdi/Mira兩部分組成,是光學顯微鏡與現代雷射技術,高靈敏探測技術,掃描控制技術以及微機圖象處理技術,螢光及標記技術的結合。CLSM為生命科學開拓了一條觀察生命活細胞的結構及特定分子、離子生物學變化的新途徑,成為分子細胞生物學,神經科學,藥理學,遺傳學等領域中新一代強有力的研究工具。

優點:

螢光標記的特異性及可定量性。

共聚焦針孔的運用,有效的消除了焦平面上下散射光,提高軸向解析度。

點光源雷射的套用,對螢光素能達到有效的激發,激發的特異性高,降低對螢光的淬滅,增強側向解析度。

雙光子的套用,相對較低平均功率的紅外激發,大大減低對活細胞的損傷;螢光激發高度聚焦在焦點處,可避免了焦點以外的光漂白(Photobleaching)和光毒(cytotoxicity)作用,延長觀察時間,是目前用於活細胞跟蹤的最理想方法。

脈衝雷射散射和吸收程度小,透射性強,對厚樣品的穿透可達400um,是對厚的組織分析的最首先方法。

結合META新技術,尤其對螢光蛋白成像具有更方便,更精確的效果。

1.

螢光標記的特異性及可定量性。

2.

共聚焦針孔的運用,有效的消除了焦平面上下散射光,提高軸向解析度。

3.

點光源雷射的套用,對螢光素能達到有效的激發,激發的特異性高,降低對螢光的淬滅,增強側向解析度。

4.

雙光子的套用,相對較低平均功率的紅外激發,大大減低對活細胞的損傷;螢光激發高度聚焦在焦點處,可避免了焦點以外的光漂白(Photobleaching)和光毒(cytotoxicity)作用,延長觀察時間,是目前用於活細胞跟蹤的最理想方法。

5.

脈衝雷射散射和吸收程度小,透射性強,對厚樣品的穿透可達400um,是對厚的組織分析的最首先方法。

6.

結合META新技術,尤其對螢光蛋白成像具有更方便,更精確的效果。

套用領域:

共聚焦及雙光子在現代生物學研究中有如下套用:

多色螢光成像(Multi-color imaging),具有多磁軌和雙向掃描,曲線掃描等特性。

三維重構(Three dimentional reconstruction)及定量分析。

實時成像(Time series,real time imaging),可進行活細胞跟蹤。

離子成像(Ion imaging)/比率成像(Ratio imaging),可進行Ca2+,Mg2+,H+,Na+,K+,Zn2+,Ni2+,Fe2+,Hg2+,Pb2+及Cd2+等成像。

螢光原位雜交(FISH:fluorescence in situ hybridization);

螢光漂白恢復(FRAP:fluorescence recovery after photobleaching);

螢光共振能量轉移(FRETM:fluorescence resonance energy transfer;

光生命期成像顯微術(FLIM:fluorescence lifetime imaging microscopy)。

螢光相關光譜(FCS:fluorescence correlation spectroscopy)。

1.

多色螢光成像(Multi-color imaging),具有多磁軌和雙向掃描,曲線掃描等特性。

2.

三維重構(Three dimentional reconstruction)及定量分析。

3.

實時成像(Time series,real time imaging),可進行活細胞跟蹤。

4.

離子成像(Ion imaging)/比率成像(Ratio imaging),可進行Ca2+,Mg2+,H+,Na+,K+,Zn2+,Ni2+,Fe2+,Hg2+,Pb2+及Cd2+等成像。

5.

螢光原位雜交(FISH:fluorescence in situ hybridization);

6.

螢光漂白恢復(FRAP:fluorescence recovery after photobleaching);

7.

螢光共振能量轉移(FRETM:fluorescence resonance energy transfer;

8.

光生命期成像顯微術(FLIM:fluorescence lifetime imaging microscopy)。

9.

螢光相關光譜(FCS:fluorescence correlation spectroscopy)。

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